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          樣品前處理方法

          閱讀:1623      發(fā)布時(shí)間:2022-9-26
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          樣品前處理方法

          圣賓儀器科技(上海)有限公司

          一、溶劑提取法

          同一溶劑中,不同物質(zhì)具有不同的溶解度。利用混合物中各物質(zhì)溶解度的不同將混合物組分*或部分分離的過程稱為萃取,也稱提取,常用方法有以下幾種:

          1.浸提法:

          浸提法又稱浸泡法。用于從固體混合物或有機(jī)體中提取某種物質(zhì),所采用的提取劑,應(yīng)既能大量溶解被提取的物質(zhì),又要不破壞被提取物質(zhì)的性質(zhì)。為了提高物質(zhì)在溶劑中的溶解度,往往在浸提時(shí)加熱。如用索氏抽提法提取脂肪。提取劑是此類方法中重要因素,可以用單一溶劑,也可以用混合溶劑。

          2.溶劑萃取法:

          溶劑萃取法用于從溶液中提取某一組分,利用該組分在兩種互不相溶的試劑中分配系數(shù)的不同,使其從一種溶液中轉(zhuǎn)移至另一種溶劑中,從而與其他組分分離,達(dá)到分離和富集的目的。通??捎梅忠郝┒范啻翁崛∵_(dá)到目的。若被轉(zhuǎn)移的成分是有色化合物,可用有機(jī)相直接進(jìn)行比色測定,即萃取比色法。萃取比色法具有較高的靈敏度和選擇性,如,雙硫腙法測定食品中的鉛含量。此法設(shè)備簡單、操作迅速、分離效果好,但是,成批試樣分析時(shí)工作量大。同時(shí),萃取溶劑常易揮發(fā),易燒,且有毒性,操作時(shí)應(yīng)加以注意。

          二、鹽析法

          向溶液中加入某種無機(jī)鹽,使溶質(zhì)在原溶劑中的溶解度大大降低,而從溶液中沉淀析出,這種方法叫做鹽析。如在蛋白質(zhì)溶液中加入大量的鹽類(硫酸銨),特別是加入重金屬鹽,使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀出來。

          在進(jìn)行鹽析工作時(shí),應(yīng)注意溶液中所加入的物質(zhì)的選擇。它應(yīng)是不會(huì)破壞溶液中所要析出的物質(zhì),否則達(dá)不到鹽析提取的目的。

          三、化學(xué)分離法

          1.磺化法和皂化法

          這是處理油脂或脂肪樣品時(shí)經(jīng)常使用的方法。例如,殘留農(nóng)藥分析和脂溶性維生素測定中,油脂被濃硫酸磺化,或被堿皂化,由疏水性變成親水性,使油脂中需檢測的非極性物質(zhì)能較容易地被非極性或弱極性溶劑提取出來。

          2.沉淀分離法

          沉淀分離法是利用沉淀反應(yīng)進(jìn)行分離的方法。在試樣中加入適當(dāng)?shù)某恋韯?使被測組分沉淀下來,或?qū)⒏蓴_組分沉淀除去,從而達(dá)到分離的目的。

          3.掩蔽法

          利用掩蔽劑與樣液中的干擾成分作用,使干擾成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴桓蓴_測定的狀態(tài),即被掩蔽起來。運(yùn)用這種方法,可以不經(jīng)過分離干擾成分的操作而消除其干擾作用,簡化分析步驟,因而在食品分析中應(yīng)用十分廣泛,常用于金屬元素的測定。

          4.色層分離法

          色層分離法又稱色譜分離法,是一種在載體上進(jìn)行物質(zhì)分離的方法的總稱。根據(jù)分離原理的不同,可分為吸附色譜分離、分配色譜分離和離子交換色譜分離等。此類方法分離效果好,近年來在食品分析中應(yīng)用得越來越廣泛。色層分離不僅分離效果好,而且分離過程往往也就是鑒定的過程。本法常用于有機(jī)物質(zhì)的分析測定。

          (1)吸附色譜分離

          吸附色譜分離法利用聚酰胺、硅膠、硅藻土、氧化鋁等吸附劑,經(jīng)過活化處理后,具有適當(dāng)?shù)奈侥芰Γ蓪?duì)被測組分或干擾組分進(jìn)行選擇性的吸附而達(dá)到分離的目的。比如:食品中色素的測定,可將樣品溶液中的色素經(jīng)吸附劑吸附(其他雜質(zhì)不被吸附),經(jīng)過過濾、洗滌,再用適當(dāng)?shù)娜軇┙馕?,得到比較純凈的色素溶液。吸附劑可以直接加入樣品中吸附色素,也可將吸附劑裝入玻璃管制成吸附柱或涂布成薄層板使用。

          (2)分配色譜分離

          分配色譜分離法根據(jù)兩種不同的物質(zhì)在兩相中的分配比不同進(jìn)行分離的,兩相中一相是流動(dòng)的,稱為流動(dòng)相;另一相是固定的,稱為固定相。當(dāng)溶劑滲透于固定相中并向上滲透時(shí),分配組分就在兩相中進(jìn)行反復(fù)分配,進(jìn)而分離,例如,多糖類樣品的紙上層析,樣品經(jīng)酸水解處理,中和后制成試液,在濾紙上進(jìn)行點(diǎn)樣,用苯酚-1%氨水飽和溶液展開,苯胺鄰苯二酸顯色劑顯色,于105℃加熱數(shù)分鐘,可見不同色斑:戊醛糖(紅棕色)、己醛糖(棕褐色)、己酮糖(淡棕色)、雙糖類(黃棕色)的色斑。

          (3)離子交換色譜分離

          離子交換色譜分離法是利用離子交換劑與溶液中的離子之間所發(fā)生的交換反應(yīng)來進(jìn)行分離的方法。根據(jù)被交換離子的電荷分為陽離子交換和陰離子交換。該法可用于從樣品溶液中分離待測離子,也可從樣品溶液中分離干擾組分。分離操作可將樣液與離子交換劑一起混合振蕩或?qū)右壕従復(fù)ㄟ^事先制備好的離子交換柱,則被測離子與交換劑上的H+或OH-發(fā)生交換,被測離子或干擾組分上柱,從而將其分離。例如,可以利用離子交換色譜分離法制備無氨水、無鉛水及分離比較復(fù)雜的樣品。

          四、濃縮法

          食品樣品經(jīng)提取、凈化后,有時(shí)凈化液的體積較大,被測組分的濃度太低,會(huì)影響最后結(jié)果的測定。此時(shí)需要對(duì)被測樣液進(jìn)行濃縮,以提高被測成分的濃度。常用的方法有常壓濃縮和減壓濃縮兩種:

          1.常壓濃縮法:

          常壓濃縮法只能用于待測組分為非揮發(fā)性的樣品試液的濃縮,否則會(huì)造成待測組分的損失。操作可采用蒸發(fā)皿直接揮發(fā)。如果溶劑需要回收,則可用一般蒸餾裝置或旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。該法操作簡便、快速,是常用的方法。

          2.減壓濃縮法:

          減壓濃縮法主要用于待測組分為熱不穩(wěn)定性或易揮發(fā)的樣品凈化液的濃縮,其樣品凈化液的濃縮需采用K-D濃縮器。濃縮時(shí),水浴加熱并抽氣減壓,以便濃縮在較低的溫度下進(jìn)行,且速度快,可減少被測組分的損失。食品中有機(jī)磷農(nóng)藥的測定多采用此法濃縮樣品凈化液。


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