Plantarray是一款基于稱重的高通量、多傳感器生理表型平臺(tái)以及植物逆境生物學(xué)研究通用平臺(tái)。該系統(tǒng)可持續(xù)、實(shí)時(shí)測(cè)量位于不同環(huán)境條件下、陣列中每個(gè)植株的土壤-植物-空氣(SPAC)中的即時(shí)水流動(dòng)。直接測(cè)量根系和莖葉系統(tǒng)水平衡和生物量增加,計(jì)算植物生理參數(shù)以及植物對(duì)動(dòng)態(tài)環(huán)境的反饋。系統(tǒng)以有效、易用、無(wú)損的方式針對(duì)植物對(duì)不同處理的反應(yīng)、預(yù)測(cè)植物生長(zhǎng)和生產(chǎn)力進(jìn)行定量比較,廣泛應(yīng)用于生物脅迫和非生物脅迫以及植物栽培加速育種研究等,脅迫研究涵蓋干旱脅迫、鹽脅迫、重金屬脅迫、熱、冷脅迫、光脅迫以及灌溉/養(yǎng)分、CO2指示、植物健康等領(lǐng)域的研究。
植物采用氣孔關(guān)閉和減少生長(zhǎng)以避免缺水的損害。生長(zhǎng)促進(jìn)激素赤霉素(GA)的水平降低導(dǎo)致對(duì)水分虧缺的耐受性增加,但其基本機(jī)制尚不清楚。研究表明,番茄DELLA蛋白質(zhì)PROCERA(PRO),是GA信號(hào)傳導(dǎo)的負(fù)調(diào)節(jié)因子,在保衛(wèi)細(xì)胞中通過(guò)增加對(duì)脫落酸(ABA)的敏感性來(lái)促進(jìn)氣孔關(guān)閉并減少水分虧缺。pro功能喪失的突變體在缺水脅迫下表現(xiàn)出增加的氣孔導(dǎo)度和快速萎蔫。過(guò)表達(dá)植株組成型的激活穩(wěn)定的DELLA蛋白(S-della),并表現(xiàn)出相反的表型。S-della對(duì)氣孔開(kāi)度和水分流失的影響在ABA缺失突變體sitiens(sit)中被強(qiáng)烈抑制,表明S-della的這些作用是ABA依賴性的。盡管DELLA對(duì)ABA水平?jīng)]有影響,但與野生型相比,S-della中的保衛(wèi)細(xì)胞ABA反應(yīng)性增加,而pro植物中的保衛(wèi)細(xì)胞ABA反應(yīng)性降低。在保衛(wèi)細(xì)胞特異性啟動(dòng)子的控制下表達(dá)S-della足以增加氣孔對(duì)ABA的敏感性并在缺水脅迫下減少水分損失,但對(duì)葉片大小沒(méi)有影響。這一結(jié)果表明DELLA促進(jìn)氣孔關(guān)閉獨(dú)立于其對(duì)生長(zhǎng)的影響。
關(guān)鍵詞:氣孔調(diào)節(jié);DELLA蛋白;保衛(wèi)細(xì)胞;ABA
1. 番茄DELLA pro功能喪失的突變體在缺水條件下表現(xiàn)出快速失水
為了研究DELLA對(duì)植物水分狀況的影響,本文測(cè)試了DELLA功能喪失的番茄突變體pro(Bassel etal.2008)對(duì)缺水脅迫的反應(yīng)。在缺水處理開(kāi)始之前,將所有植物灌溉至飽和。4d后,未灌溉的pro植株開(kāi)始萎蔫,而對(duì)照植株生長(zhǎng)正常(圖1A)。干旱處理開(kāi)始后第4天,pro的葉片相對(duì)含水量(RWC)降低了30%;而M82降低了10%(圖 1B)。上午10點(diǎn)在pro植株中測(cè)得的氣孔導(dǎo)度比M82的值高50%(圖 1C)。使用稱重傳感器(蒸滲儀)監(jiān)測(cè)溫室中灌溉植株的全株蒸騰作用,同時(shí)記錄每株植物的每日稱重變化情況。Pro植株的每日蒸騰速率顯著高于M82植株的測(cè)量值(圖1D)。對(duì)取自灌溉中的pro和M82植株背面葉表皮的印記進(jìn)行顯微鏡分析顯示,pro(72 μm2) 植株的氣孔面積遠(yuǎn)大于M82植株(37μm2;圖1E)。 pro氣孔略大于M82,二者密度相近(補(bǔ)充圖1)。這些結(jié)果表明,在pro中觀察到的快速失水是由于氣孔孔隙面積增加,進(jìn)而導(dǎo)致氣孔導(dǎo)度和蒸騰作用增加。
圖2. DELLA 活性促進(jìn)保衛(wèi)細(xì)胞對(duì) ABA 的反應(yīng)
在灌溉與缺水條件下M82、pro和proΔ17葉片中的ABA含量沒(méi)有顯著差異(圖 5A),表明DELLA不會(huì)促進(jìn)番茄葉片中ABA的積累。用不同濃度的ABA處理M82、pro和rgaΔ17葉片的去皮遠(yuǎn)軸表皮條,發(fā)現(xiàn)三種植株的氣孔孔徑均有不同程度的減小,這些結(jié)果表明DELLA活性影響保衛(wèi)細(xì)胞對(duì)ABA的反應(yīng)。除了對(duì)氣孔關(guān)閉的影響外,ABA 還促進(jìn)基因表達(dá),P5CS1和RAB18兩種基因在proΔ17保衛(wèi)細(xì)胞中的表達(dá)顯著高于M82(圖 5D 和 5E),表明S-della組成性地促進(jìn)保衛(wèi)細(xì)胞中的 ABA反應(yīng)。在H2O2積累的檢測(cè)中,proΔ17保衛(wèi)細(xì)胞對(duì)ABA的反應(yīng)明顯強(qiáng)于M82。在所有的M82、pro 和 proΔ17檢查品系中山梨糖醇造成的氣孔關(guān)閉程度相近(圖5F),結(jié)果表明DELLA活性不參與ABA獨(dú)立的氣孔關(guān)閉。
Plantarray高通量植物生理表型平臺(tái)和植物逆境生物學(xué)生理研究平臺(tái)--番茄研究2
Plantarray高通量植物生理表型平臺(tái)和植物逆境生物學(xué)生理研究平臺(tái)--番茄研究3
Plantarray高通量植物生理表型平臺(tái)和植物逆境生物學(xué)生理研究平臺(tái)--番茄研究4
Plantarray高通量植物生理表型平臺(tái)和植物逆境生物學(xué)生理研究平臺(tái)--番茄研究5
Plantarray高通量植物生理表型平臺(tái)和植物逆境生物學(xué)生理研究平臺(tái)-西紅柿研究6
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