詳細介紹
品牌:ZCIBIO
產(chǎn)品名稱:植物MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒
應(yīng)用領(lǐng)域:植物MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒僅供科研實驗,不得用于臨床診斷,使用前請認真閱讀說明書
保存條件:2~8℃,有效期6個月。
我沒有足量的稀釋液去稀釋所有的樣品,怎么辦?
◆ 試劑盒內(nèi)提供說明書中所指的足量的稀釋液。能保證所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品檢測兩次。
◆ 如果沒有推薦的稀釋度,或者需要大量稀釋,請在實驗前計算出所需的稀釋液總量,然后聯(lián)
系技術(shù)服務(wù)部門獲取額外的稀釋液。
我能否使用試劑盒內(nèi)非推薦的樣品類型?
◆ 試劑盒內(nèi)說明書中所指的樣品類型是經(jīng)過驗證可行的。其它未推薦的樣品類型是沒有經(jīng)過
任何檢測的。
我使用對照的檢測結(jié)果都在范圍外,為什么?
◆ 如果使用對照,其濃度應(yīng)該是在某一特定范圍內(nèi)。如果對照值在范圍外,則是無效測定。
◆ 確定對照具有重復(fù)性。
標(biāo)本的采集與保存
1.植物標(biāo)本的采集及保存
(1)稱取0.1g(誤差±3%以內(nèi))新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;
(2)加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度過夜;
(3)于4度,8000rpm,離心20分鐘,取上清;
(4)上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%乙(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循環(huán)。過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,保存?zhèn)溆茫?/span>
(5) 上樣前加入pH7.4 PBS緩沖液(1ml定容)?;靹蚝笫覝胤胖?0分鐘,然后4度離心(8000rpm,15分鐘),取上清并暫時保存于4度待用。
3.組織勻漿:
用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織再剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9mL 的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,取上清檢測。
4.細胞培養(yǎng)上清或其他生物標(biāo)本:
請 1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(如檢測細胞內(nèi)蛋白,則對需要細胞進行破碎處理)。
注意:以上標(biāo)本均需密封保存,4℃保存應(yīng)小于一周,-20℃ 不應(yīng)超過1個月,-80℃保存可放置更久。
標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之溶解。
標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。
此產(chǎn)品提供免費代測服務(wù),上海茁彩生物科技有限公司專注酶聯(lián)免疫,專注ELISA,期待您的來電!
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