品牌：ZCIBIO
產(chǎn)品名稱： 植物維生素D（VD）ELISA試劑盒
英文名稱：Plant VD elisa kit
檢測方法：夾心法
實驗樣本：植物的根莖葉等其他相關(guān)生物樣本
應(yīng)用領(lǐng)域：僅供科研實驗，不得用于臨床診斷，使用前請認(rèn)真閱讀說明書
保存條件：2~8℃，有效期6個月。

品牌：ZCIBIO

產(chǎn)品名稱：植物維生素D(VD)ELISA試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：48T（次）/96T（次）

實驗樣本：植物的根莖葉等其他相關(guān)生物樣本

應(yīng)用領(lǐng)域：植物維生素D(VD)ELISA試劑盒僅供科研實驗，不得用于臨床診斷，使用前請認(rèn)真閱讀說明書

保存條件：2~8℃，有效期6個月。

我沒有足量的稀釋液去稀釋所有的樣品，怎么辦？
◆ 試劑盒內(nèi)提供說明書中所指的足量的稀釋液。能保證所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品檢測兩次。
◆ 如果沒有推薦的稀釋度，或者需要大量稀釋，請在實驗前計算出所需的稀釋液總量，然后聯(lián)
系技術(shù)服務(wù)部門獲取額外的稀釋液。
我能否使用試劑盒內(nèi)非推薦的樣品類型？
◆ 試劑盒內(nèi)說明書中所指的樣品類型是經(jīng)過驗證可行的。其它未推薦的樣品類型是沒有經(jīng)過
任何檢測的。
我使用對照的檢測結(jié)果都在范圍外，為什么？
◆ 如果使用對照，其濃度應(yīng)該是在某一特定范圍內(nèi)。如果對照值在范圍外，則是無效測定。
◆ 確定對照具有重復(fù)性。

標(biāo)本的采集與保存

1.植物標(biāo)本的采集及保存

（1）稱取0.1g（誤差±3%以內(nèi)）新鮮植物組織樣本，在液氮中充分研磨；

（2）加入1ml的提取液（80%甲醇）, 置于-20度過夜；

（3）于4度，8000rpm，離心20分鐘，取上清；

（4）上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是： 80%甲醇（1ml）平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用100%甲醇（5ml）洗柱→100%乙（5ml）洗柱→100%甲醇（5ml）洗柱→循環(huán)。過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干，保存?zhèn)溆茫?/span>

（5） 上樣前加入pH7.4 PBS緩沖液（1ml定容）。混勻后室溫放置30分鐘，然后4度離心（8000rpm，15分鐘），取上清并暫時保存于4度待用。

3.組織勻漿：

用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織.剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS（一般按 1:9 的重量體積比，比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9mL 的 PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘，取上清檢測。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物標(biāo)本：

請 1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（如檢測細(xì)胞內(nèi)蛋白，則對需要細(xì)胞進行破碎處理）。

注意:以上標(biāo)本均需密封保存，4℃保存應(yīng)小于一周，-20℃ 不應(yīng)超過1個月，-80℃保存可放置更久。

標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫，不應(yīng)加熱使之溶解。

標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。

標(biāo)本說明

• 本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。

• 實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過高，應(yīng)對標(biāo)本進行稀釋，使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

• 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預(yù)實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。

• 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。

• 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。

• 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

此產(chǎn)品提供免費代測服務(wù)，上海茁彩生物科技有限公司專注酶聯(lián)免疫，專注ELISA，期待您的來電！

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