詳細介紹
品牌:ZCIBIO
產(chǎn)品名稱: 植物血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:48T(次)/96T(次)
實驗樣本:植物的根莖葉等其他相關(guān)生物樣本
應(yīng)用領(lǐng)域:植物血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒僅供科研實驗,不得用于臨床診斷,使用前請認真閱讀說明書
保存條件:2~8℃,有效期6個月。
度/重復(fù)性( Precision/Reproducibility)
免疫測定的準(zhǔn)性可由酶標(biāo)板孔之間的重復(fù)性和每次檢測之間的重復(fù)性決定。由高CV值引起的準(zhǔn)確度一般由兩個因素引起:移液操作和洗液操作。
我需要在孔內(nèi)混合試劑嗎?
◆ 當(dāng)多種試劑滴加至一個孔內(nèi)時(比如稀釋液和樣品),需要在孔內(nèi)進行混合。滴加試劑和樣品至每孔的中心,輕拍酶標(biāo)板使其充分混合。
我的試劑/樣品是粘稠狀的,不易于吸取移動,怎么辦?
◆ 在吸取粘稠液體時,請在待取液體中停留一段時間,待體積達到平衡后再移出。
◆ 用相應(yīng)試劑預(yù)洗滌槍頭以補償液體的表面張力。
微量移液器
◆ 槍頭中的液體體積不足或者不均勻,表明移液器需要被校準(zhǔn)。檢查移液器的功能,必要時重新校準(zhǔn)。
◆ 在滴加試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,樣品時應(yīng)及時更換槍頭以避免互相污染。
◆ 檢查槍頭是否安裝完好。如果安裝不得當(dāng),可能會導(dǎo)致吸液和排出液體是體積不準(zhǔn)確。
◆ 從容器中移出槍頭時,將槍頭輕靠在受液容器壁上移去殘留在槍頭外表面的液體。
正確洗板方法
◆ 如果使用自動洗板儀,抽吸裝置或者多道移液器。 確保每管都被適當(dāng)抽吸。在孔內(nèi)液體被全部抽走之后不要再將裝置至于孔內(nèi)過分抽吸。按照說明書所示重復(fù)以上步驟。最后一次洗板之后,將板內(nèi)液體傾倒*,用干凈紙巾拍打表面并擦干。
◆ 洗板太快或者太慢,不*洗板或者抽吸。
◆ 孔內(nèi)干燥等各種因素都將影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。按照試劑盒內(nèi)說明書迅速進行下一步實驗操作。
我是否可以使用同一容器盛放所有的試劑?
◆ 不可以。請使用不同的容器盛放不同的試劑以避免污染。
◆ 有些待分析物對污染極其敏感(比如唾液,氧化試劑等等)。根據(jù)說明書,注意預(yù)防試劑盒內(nèi)試劑污染。
我可以重復(fù)使用蓋板嗎?
◆ 再利用的蓋板上可能含有上一步驟的殘留物,可能會污染孔內(nèi)現(xiàn)有的成分從而導(dǎo)致性降
低。所以在每次孵育的時候使用新的蓋板。很多因素都能影響標(biāo)準(zhǔn)曲線的結(jié)果,其中就包括制備和操作。
3.組織勻漿:
用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織.剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9mL 的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,取上清檢測。
4.細胞培養(yǎng)上清或其他生物標(biāo)本:
請 1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(如檢測細胞內(nèi)蛋白,則對需要細胞進行破碎處理)。
注意:以上標(biāo)本均需密封保存,4℃保存應(yīng)小于一周,-20℃ 不應(yīng)超過1個月,-80℃保存可放置更久。
標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之溶解。
標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。
標(biāo)本說明
本公司只對試劑盒本身負責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高,應(yīng)對標(biāo)本進行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。
若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
此產(chǎn)品提供免費代測服務(wù),上海茁彩生物科技有限公司專注酶聯(lián)免疫,專注ELISA,期待您的來電!
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