詳細介紹
羥脯氨酸(Hyp)測定試劑盒(消化法)產品簡介
羥脯氨酸在膠原蛋白中占13.4%,在彈性蛋白中占極少量,其它蛋白中均不存在。而膠原蛋白大多分布在皮膚、腱、軟骨、血管等處,因此羥脯氨酸的量能反映結締組織疾病的膠原代謝情況。有人把皮膚中羥脯氨酸的測定作為篩選抗衰老藥物的一個指標。在發(fā)育階段隨年齡的增長,其羥脯氨酸在尿中排泄增加,而發(fā)育停止后穩(wěn)定。老年人的羥脯氨酸比年輕人要少。鼠患有自發(fā)性高血壓及繼發(fā)性高血壓時,尿中羥脯氨酸含量增加。手術創(chuàng)傷會導致尿羥脯氨酸排泄量的增加,因高脂、低蛋白、酒精中毒及毒物、營養(yǎng)不良,或肝細胞變性壞死,通過炎癥使纖維增加,分割肝小葉,導致肝硬化。肝纖維化時,肝內主要增加的成分為膠原纖維,羥脯氨酸為膠原纖維所*,測定肝羥脯氨酸的含量,可換算成肝膠原蛋白的含量,以反映肝纖維化程度。膠原纖維分解主要依賴膠原酶和其它蛋白酶的作用,其分解產物羥脯氨酸從尿中排出,測定尿羥脯氨酸的含量,可反應膠原降解的情況。通過測定組織及尿中羥脯氨酸的含量,一方面可以判斷纖維化程度,同時可以篩選預防與治療的藥物。
產品優(yōu)點如下:
1、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
2、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=2.1%。
3、回收試驗: X =102%。
4、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
5、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織 、尿液以及各種水產等,效果均佳。
羥脯氨酸(Hyp)測定試劑盒(消化法)所需儀器及自備試劑:
所需儀器及自備試劑:
1、可見分光光度計(比色測定波長為460nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃和60℃)
3、漩渦混勻器
4、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和R2、R3,37℃水浴15分鐘
2、取以上混合液加入R4和顯色劑,37℃水浴30分鐘
3、加入R7,60℃水浴10分鐘,460nm波長,1cm光徑,比色
操作流程:
1、按說明書操作取50l樣本加入底物緩沖液
2、420nm波長,1cm光徑測OD1
3、37℃水浴10分鐘后420nm波長,1cm光徑測OD2
技術參數(shù)
批間CV | 批內CV | 回收率 | zui底檢出線 | 檢測范圍 |
4.11 | 3.5 | 104 | 0.5nmol/ml | 0-113.0 nmol/ml |
文獻參考:
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