詳細介紹
人骨骼肌成肌細胞說明:
骨骼肌細胞是人體內(nèi)最大的細胞之一。它們是成肌細胞融合形成的多核細胞。骨骼肌再生是有許多因素參與的復(fù)雜過程。當骨骼肌受損時,靜止的、被稱為衛(wèi)星細胞的成肌細胞被激活增殖、遷移、最終分化。多種的細胞信號途徑,包括磷脂酰肌醇(-3)激酶、鈣神經(jīng)素、JAK2/STAT3和有絲分裂原活化蛋白激酶,參與骨骼肌的生長。在體外培養(yǎng)的人類骨骼肌細胞中進行的骨骼肌分化實驗發(fā)現(xiàn)胰島素刺激的葡萄糖轉(zhuǎn)運是葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4介導(dǎo)的,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖也與此過程有關(guān)。單核細胞融合形成多核肌管是骨骼肌發(fā)育的中心事件。該過程的發(fā)生和進展中,成肌細胞控制著一系列復(fù)雜的交互活動。骨骼肌細胞的培養(yǎng)是研究細胞分化中該過程的重要模型。
人骨骼肌成肌細胞(HSkMC)提取于人肩帶骨骨骼肌組織,原代凍存。每管含有細胞數(shù)>5×105cells/ml,此細胞通過對myosin, actin和actinin免疫熒光染色驗證,經(jīng)測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。細胞可以達到15倍增。
推薦培養(yǎng)基: (SkMCM, Cat. No. 3501)
產(chǎn)品使用說明:僅供科研研究使用。
貨號 | 3100 |
產(chǎn)地 | 美國 |
縮寫 | HPAEC |
規(guī)格 | 5x10^5cells /vial |
用途 | 科研 |
運輸 | 干冰 |
保存 | 液氮 |
附:
T25瓶細胞處理方法
收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯(lián)系。并進行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2.將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3.預(yù)熱*培養(yǎng)基(含1%雙抗)。
4.顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5.①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。
②若細胞密度較大,達到80%以上,將細胞傳代培養(yǎng)。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細胞后如細胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,請當天反饋并提供圖片,且保存前三天照片以便分析。7天內(nèi)反饋,細胞本身問題免費重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費售后
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