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elisa試劑盒的用途及組織結(jié)構(gòu)
閱讀：466 發(fā)布時(shí)間：2019-8-5 elisa試劑盒的用途：
ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或者抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或者抗體任然保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或者抗體即保留其免疫學(xué)活性，又保留了酶的活性，在測(cè)定時(shí)受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或者抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他的物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或者抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或者定量分析。由于酶的催化效率很高，間接的放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的靈敏度。ELISA可用于測(cè)定抗原，也可以用于測(cè)定抗體。
ELISA試劑盒的組成結(jié)構(gòu)：
一、血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱量和肉毒素的試管。收集血液后，1000*g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心的分離。
二、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
三、細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
四、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
五、 保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑盒成分
：
一、預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
二、 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
三、標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
四、 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
五、顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
六、 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
七、終止液: 1N硫酸 12mL x 1
八、濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)