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          ?小鼠突觸融合蛋白2(STX2)ELISA試劑盒操作步驟

          閱讀:151          發(fā)布時間:2022-1-11

          小鼠突觸融合蛋白2(STX2)ELISA試劑盒操作步驟:


          1.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。


          2.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  


          3.         配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用


          4.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


          5.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。


          6.         溫育:操作同3。


          7.         洗滌:操作同5。


          8.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.


          9.         終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。


          10.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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