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培養(yǎng)及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

 

 

儀器設(shè)備與器具：

1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺(tái)。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 滅菌釜。

9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

基本概念：

(1)菌群：由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。

(2) 菌屬：菌種的上一級(jí)分類，通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。

(3)是細(xì)菌最基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體，與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異；當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí)，菌種是指細(xì)菌的種子（用來長期保存）資源。

(4) 菌型：同一菌種的不同細(xì)菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。

(5) 菌株：由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。

操作步驟如下：

1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌：121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí)，冷卻后，經(jīng)無菌檢查后備用。

2 斜面培養(yǎng)物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無菌的液體石蠟在無菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏 4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時(shí)間2～10年。 4.2　保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無菌的液體石蠟。

5 恢復(fù)培養(yǎng)   恢復(fù)培養(yǎng)時(shí)，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次。

0.1%蛋白胨水 500ml/瓶 用于樣品的制備和稀釋

PH7.0的NaCl蛋白胨緩沖液 500ml/瓶 用于制備藥品樣品的稀釋液或沖洗液

PH6.8磷酸鹽緩沖液 500ml/瓶 用于樣品稀釋處理

含225mlEC肉湯均質(zhì)袋 10個(gè)/包 用于致瀉大腸埃希氏的增培養(yǎng)

含225ml堿性蛋白胨水均質(zhì)袋 10個(gè)/包 用于霍亂弧的選擇性增培養(yǎng)

含225ml蒸餾水均質(zhì)袋 10個(gè)/包 用于樣品的制備或稀釋

含250mlPreston肉湯均質(zhì)袋(雙料) 250ml/袋*10 用于空腸彎曲的培養(yǎng)

MUG快速鑒定大腸試劑 5ml*10支/盒 用于MUG培養(yǎng)基配制

MIU培養(yǎng)基 20支/包 用于細(xì)的復(fù)合生化試驗(yàn)

MUG快速鑒定大腸試劑 5ml*10支/盒 用于快速鑒定大腸桿

磷酸鹽緩沖液 （PBS pH7.2） 9ml*20支/包 用于落總數(shù)，大腸群，金葡，大腸桿樣品制備

改良EC（mEC+n）肉湯 10ml*20支/包 用于O157選擇性增

改良EC（mEC+n）肉湯 9ml*20支/包 用于O157選擇性增

三糖鐵管 5ml*20支/包 用于腸桿科細(xì)的生化反應(yīng)篩選

灰樹花價(jià)格HOXA5  同源異型盒基因HOXA5蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

ANKRD20A1  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-PTEN(Ser385)  磷酸化瘤抑制基因PTEN抗體 規(guī)格: 0.1ml

Fc ε RIα/Fc epsilon RI  FC段IgE受體α多肽抗體 規(guī)格: 0.1ml

ALDH1A1  胞質(zhì)乙醛脫1抗體 規(guī)格: 0.2ml

DC-SIGN/CD209  細(xì)胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-ELk1(Thr417)  磷酸化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 規(guī)格: 0.1ml

BMP6  骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml

NCOA2  類固受體激活蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-human IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1mlGREB1  雌調(diào)控蛋白GREB1抗體 規(guī)格: 0.1ml

C1ORF111  1號(hào)染色體開放閱讀框111抗體 規(guī)格: 0.2mlATXN1/Ataxin-1  脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

HP1 alpha  異染色質(zhì)蛋白1-α(HP1α)抗體 規(guī)格: 0.1mlIntegrin alpha L/CD11a  整合素αL抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1mlDMTF1  周期素D相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml