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          上海研生實業(yè)有限公司>>蛋白>>活性蛋白/AP>>羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白

          羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-04-12 14:33:37瀏覽次數(shù):261

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 用于科研
          英文名稱 Active Carboxylesterase 5A (CES5A) 物種 Homo sapiens (Human,人)
          來源 原核表達 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
          羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:Shiga toxin II subunit B重組腸出血性大腸桿菌 (EHEC) stx2B / Shiga toxin II subunit B 蛋白 (His 標簽) Protein
          TP I (topoisomerase I 0.5mgTP I (topoisomerase I ) 拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗原
          SERPING1重組人 SerpinG1

          詳細介紹

          標簽選擇:

          親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHOHEK293

          b.      表達載體的構(gòu)建

          c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

          d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

          e.      表達小試,條件優(yōu)化

          f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAEWB

          g.      大量表達

          h.      親和純化

          i.        檢測和鑒定

          僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          物種

          性狀

          來源

          羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白

          Homo sapiens (Human,人)

          凍干粉

          原核表達

          英文名稱:Active Carboxylesterase 5A (CES5A)

          CES7; CES4C1; CES5; CAUXIN; Carboxylesterase-like urinary excreted protein homolog

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

          性狀:凍干粉

          純度:> 90%

          等電點:5.9

          應(yīng)用:Cell culture; Activity Assays.

          規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

          相關(guān)產(chǎn)品:

          TP I (topoisomerase I 0.5mgTP I (topoisomerase I ) 拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗原

          ARL6IP6 Protein Human 重組人 ARL6IP6 蛋白 (Fc 標簽)

          Shiga toxin II subunit B重組腸出血性大腸桿菌 (EHEC) stx2B / Shiga toxin II subunit B 蛋白 (His 標簽) Protein

          LAMP3 Protein Human 重組人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 蛋白 (Hi

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          原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

          e.      蛋白表達小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGEWB鑒定

          GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

            誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

          操作步驟 :

          根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

          b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

          c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

          生殖支原體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycoplasma genitaliumPCR 50T

          施氏油脂線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Elaeophora schneideriPCR 50T

          飾紋汀蛙虹彩病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Boheliridovirus(BIV)PCR 50T

          嗜吞噬細胞無漿體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Anaplasma phagocytophilumPCR 50T

          MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 層粘連蛋白受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Anti-beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-BLNK(Tyr491) 0酸化T淋巴細胞連接蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

          多聚賴酸溶液0.1%(Poly-L-Lysine)10X 10ml 免疫組化用

          Vimentin 英文名稱: 波形蛋白抗體 0.1ml

          DNAH7 英文名稱: 軸絲動力蛋白7抗體 0.2ml

          Anti-beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          羧酸酯酶5A(CES5A)活性蛋白痘苗病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Vaccinia Virus(VV)PCR

          都柏林沙門氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Salmonella dublinPCR

          東方泰勒蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Theileria orientalisPCR

          東方蜜蜂微孢子蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Nosema ceranaePCR

          注意事項:  

          1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作


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