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PROPIDIUM

培養(yǎng)及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

 

 

儀器設(shè)備與器具：

1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺(tái)。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 滅菌釜。

9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

基本概念：

(1)菌群：由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。

(2) 菌屬：菌種的上一級(jí)分類，通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。

(3)是細(xì)菌最基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體，與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異；當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí)，菌種是指細(xì)菌的種子（用來長(zhǎng)期保存）資源。

(4) 菌型：同一菌種的不同細(xì)菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。

(5) 菌株：由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。

操作步驟如下：

1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌：121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí)，冷卻后，經(jīng)無菌檢查后備用。

2 斜面培養(yǎng)物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無菌的液體石蠟在無菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏 4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時(shí)間2～10年。 4.2　保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無菌的液體石蠟。

5 恢復(fù)培養(yǎng)   恢復(fù)培養(yǎng)時(shí)，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長(zhǎng)繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次。

PPAR Gamma  過氧化活化增生受體γ抗體 0.1ml

KLHL25  Kelch樣25抗體 規(guī)格: 0.2ml

TM4SF3  TM4SF3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Nogo-B/A  軸索過度生抑制因子-B/A抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-PDPK1(Ser410)  磷化3磷肌依賴性激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

RAE1  mRNA結(jié)合抗體 規(guī)格: 0.1ml

BXDC1  BXDC1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Plasminogen  纖維溶原抗體 規(guī)格: 0.1ml

ANKRD40  錨重復(fù)結(jié)構(gòu)域40抗體 規(guī)格: 0.2ml

LMP2A  EB病毒LMP-2A抗體 0.2ml

FAM50A  FAM50A抗體 規(guī)格: 0.2ml

MATK  激細(xì)胞分裂抗體 規(guī)格: 0.2mlZNF415  鋅指415抗體 規(guī)格: 0.2ml

滑菇、光帽黃傘價(jià)格CNR1/CB1  鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/APC  APC標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml

URG4  上調(diào)基因4抗體(N端) 規(guī)格: 0.2ml

phospho-MAP3K9+MAP3K10(Thr312 + Thr266)  磷酸化絲裂原活化蛋白激3K9抗體 規(guī)格: 0.1ml

HPV33 E6  人類狀瘤病毒33抗體 0.2ml

Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Ghrelin 28  腦腸肽抗體 規(guī)格: 0.1ml

CIRBP  冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

KCNC3/Kv3.3  離子通道蛋白Kv3.3抗體 規(guī)格: 0.2ml

KCNMB1/Maxi Potassium channel beta  鈣激活鉀通道蛋白β1抗體 規(guī)格: 0.2ml

TRIB2  MAPK調(diào)控蛋白TRB2抗體 規(guī)格: 0.2ml

NT5C1A  胞質(zhì)5'核苷酸1A抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.5ml

Bad  相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體 規(guī)格: 0.1ml