儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌最基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
培養(yǎng)及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
猴ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴天青殺素1(AZU1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴嗜鉻蛋白B(CgB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴血管緊張肽A(ATA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴雙調(diào)蛋白(AR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴血紅蛋白H(HbH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴纖蛋白原(FG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴糖蛋白V(GP5)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SPA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴周期素依賴性激4(CDK4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴線粒體肌酸激1B(CKMT1B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猴蛋白二硫化物異構(gòu)A5(PDIA5)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
拉曼被孢霉價(jià)格Phospho-BLNK(Tyr96) 磷酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlLaminin B2 gamma 1 層粘連蛋白B2γ1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1mlNanog 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Persephin PSP抗體 規(guī)格: 0.1mlMMP-7 基質(zhì)金屬-7抗體 規(guī)格: 0.1ml
EPCR/CD201 內(nèi)皮細(xì)胞活化蛋白受體抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-EGFR (Tyr1092) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlBCMA/CD269 B淋巴細(xì)胞成熟因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6 規(guī)格: 0.1mlVillin 絨毛蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-CHK2 (ser516) 磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體 規(guī)格: 0.1mlTFAR19/PDCD5 凋亡相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1mlFactor VIII 第八因子抗體 0.1ml
Donkey anti-human IgG whole serum 驢抗人IgG抗清 規(guī)格: 1mlCBFA1/RUNX2 核心結(jié)合因子α1抗體(成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子)Cbfα1 規(guī)格: 0.1ml
phospho-PRKCB(Ser642) 磷酸化蛋白激C抗體 規(guī)格: 0.1mlANKS6 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml
HCV-NS1 丙型肝炎病毒-NS1抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-CREB-1(Ser121) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
HLC3/Kanadaptin 肺基因蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlPCDHGC3/PCDH2 原鈣粘蛋白γC3抗體 規(guī)格: 0.2ml
BTG1 B細(xì)胞遷移基因1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-IRAK4(Thr345) 磷酸化白介素-1受體相關(guān)激4抗體 規(guī)格: 0.1ml
IL-6 白介素6 規(guī)格: 0.1mlRNF150 環(huán)指蛋白150抗體 規(guī)格: 0.2ml
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無菌的液體石蠟在無菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。