操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌最基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
巴西蘇木素 英文名稱:Brazil hematoxylin 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 碳鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體
木栓 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg ELISA Kit for Human ATP-dependent RNA helicase DDX42小鼠組織A(CTSA)ELISA試劑盒,英文名:CTSA ELISA Kit
纖維素(活>45 U/mg) 質(zhì)量規(guī)格:活>45 U/mg,BC Cellulase 嗜鹽選擇性瓊脂/Halophilic Bacteria Selective Agar副溶血性弧的選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
阿呋唑嗪 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 100mg 自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體 cath-G ELISA Kit 組織G(cath-G)ELISA試劑盒
苷H 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg 細(xì)胞角蛋白12抗體 17-KS ELISA Kit 17-類固(17-KS)ELISA試劑盒
胡椒堿 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg/vial 人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠G蛋白β1(GNβ1)ELISA試劑盒,英文名:GNβ1 ELISA Kit
馬來(lái)氟汀 質(zhì)量規(guī)格:>98% Flupirtine maleate 小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:P388
迷迭香精油 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg ELISA Kit for Human 2', 3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase小鼠狀腺過(guò)氧化物(TPO)ELISA試劑盒,英文名:TPO ELISA Kit
Ⅳ 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 ELISA Kit for Human Transcription factor Maf大鼠三腺原氨(TT3)ELISA試劑盒,英文名:TT3 ELISA Kit
蒙花苷 英文名稱:Linarin 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 彈性抑制劑抗體
阿糖胞苷 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) Cytarabine Hoagland Nitrogen-free MediumBR20升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.5ml ELISA Kit for Human Heparanase小鼠蛋白激Cε(PKCε)ELISA試劑盒,英文名:PKCε ELISA Kit
隱丹參 英文名稱:Cryptotanshinone 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白5抗體
施氏葡萄球菌施氏亞種價(jià)格雜質(zhì)Ⅰ CAS 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢
糖精 CAS 規(guī)格: 1000mg 訂購(gòu)|咨詢
防己諾林堿(漢防己乙素) CAS 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
CAS 50-23-7 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢
二十八烷 CAS 557-61-9 規(guī)格: 10mg 訂購(gòu)|咨詢
川射干 CAS 規(guī)格: 1g 訂購(gòu)|咨詢
CAS 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢
刺五加苷E CAS 39432-56-9 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
氏葡萄糖瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基 CAS 規(guī)格: 19.5g/300ml 訂購(gòu)|咨詢
皂苷Rgl CAS 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
甘 CAS 87-78-5 規(guī)格: 300mg 訂購(gòu)|咨詢
唑肟 CAS 68401-81-0 規(guī)格: 100mg 訂購(gòu)|咨詢
氮卓斯汀 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購(gòu)|咨詢
鹿茸(馬鹿) CAS 規(guī)格: 0.5g 訂購(gòu)|咨詢