測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,僅供科研使用。
產(chǎn)品名稱 | 測(cè)定方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒 | 微量法、可見分光光度法 | 100管/96樣 、50管/48樣 | BJ-01S85353 |
商品介紹:
測(cè)定意義
磷脂酶D(EC3.1.4.4)即磷脂酰膽堿水解酶,是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類酶的總稱,廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中,具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等功能。
測(cè)定原理
磷脂酶D催化水解磷脂酰膽堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和膽堿,膽堿在膽堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫,過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì),在500nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、無水乙醇。
通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
phospho-IRS1(Ser789) 磷化胰島受體底物-1抗體 規(guī)格: 0.1mlMorphine 啡抗體 規(guī)格: 0.2ml
PRMT4 組氨甲基轉(zhuǎn)移CARM1抗體 規(guī)格: 0.2mlKF1/ZFP103 鋅指103抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-HER4 (Tyr1284) 磷化HER4抗體 規(guī)格: 0.1ml
BAG2 Bcl-2結(jié)合抑凋亡2抗體 規(guī)格: 0.1ml
FAM46D/CT112 瘤/睪抗原112抗體 規(guī)格: 0.2mlGPS1/CSN1 G通路抑制1抗體 規(guī)格: 0.2ml
CDKAL1 周期依賴性激5調(diào)節(jié)1樣1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格: 0.3ml
NPY2R 神經(jīng)肽Y受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Arhgef2/GEF H1 Rho鳥交換因子2抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM161A FAM161A抗體 規(guī)格: 0.2ml
MRP1/ABCC1 多藥耐藥相關(guān)1抗體 規(guī)格: 0.1ml
磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒原花青 規(guī)格: UV≥95%,20mg/支
546-43-0土木香內(nèi)酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
芥甲酯 規(guī)格: 1ml
2468-21-5酒石長(zhǎng)春質(zhì);Catharanthin 規(guī)格: 20mg
20702-77-6新橙皮二氫查爾 規(guī)格: 20mg
羊膽粉 規(guī)格: 0.1g
55290-64-7噻節(jié)因;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 規(guī)格: 0.1g
1257-08-5表兒茶沒食子酯 規(guī)格: 20mg
米諾環(huán) 規(guī)格: 100mg
D-甘露糖 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg