詳細介紹
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
牛腺病毒通用PCR檢測試劑盒 | Bovine Adenovirus(BAV1) PCR | 50T |
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
定量PCR方法:
熒光定量PCR探針法 | 熒光定量PCR SYBR Green染料法 | 快速PCR | 多重 PCR |
探針法即除了引物外另外設(shè)置一個探針,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團和淬滅集團,這個時候,兩個平衡不發(fā)光,但是當DNA通過引物合成的時候,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團和淬滅集團,兩個距離較遠,發(fā)光集團產(chǎn)生熒光,被機器收集到信號,從而檢測基因的量 | 染料能夠與雙鏈結(jié)合,當PCR擴增的時候,染料結(jié)合到DNA上,從而發(fā)光,單個的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號,我們可以看出,染料法特異性不強,只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光。 | 在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴增,且不會影響擴增產(chǎn)量和效率。快速循環(huán)條件尤其適用于具有高擴增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個結(jié)合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/2至1/3,卻能維持較高的擴增效率。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,以進一步縮短PCR時間。這一過程也被稱為 兩步PCR法。 | 多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應(yīng)管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。 |
相關(guān)產(chǎn)品:
單增李斯特菌prfA基因(274bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒
單增李斯特菌prfA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法)
彈狀病毒PCR檢測試劑盒
登革熱病毒Ⅰ、Ⅱ型PCR檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度
IgG 兔抗豚鼠IgG 1mg
Fc ε RIα: FC段IgE受體α多肽抗體 0.1ml
聚組抗體/抗His tag標簽抗體 Anti-HisX6/6His/His tag 0.1ml
Anti-Phospho-PKR (Thr446) /FITC 熒光素標記0酸化蛋白R抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Rictor (Thr1135) 0酸化雷帕靶蛋白復合體2抗體 規(guī)格 0.1ml
Monkey IgG (親和化) 猴IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 10mg
小鼠載脂蛋白B100(Apo B100)ELISA試劑盒 ,英文名: Apo B100 ELISA Kit
小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA檢測試劑盒Mouseai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit 96T/48T
人精(Arg)免疫試劑盒 Human Arginine,Arg ELISA kit
RatAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠELISAKit大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Mousealkalinephosphatase,ALPELISA試劑盒小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
牛腺病毒通用PCR檢測試劑盒5-Benzyl L-glutamate 1676-73-9 中文名:L-谷5-芐酯 分子式:C12H15NO4 度:98.0% 小鼠抗酸性0酸酶elisa試劑盒 小鼠抗酸性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗酸性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗酸性0酸酶試劑盒、小鼠抗酸性0酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
5-Benzyl D-glutamate 2578-33-8 中文名:D-谷5-苯甲酯 分子式:C12H15NO4 度:98.0% 小鼠解整合素樣金屬elisa試劑盒 小鼠解整合素樣金屬試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠解整合素樣金屬試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠解整合素樣金屬試劑盒、小鼠解整合素樣金屬eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
5-Benzoylpentanoic acid 4144-62-1 中文名:5-苯甲?;焖?span> 分子式:C12H14O3 度:98.0% 小鼠堿性0酸酶elisa試劑盒 小鼠堿性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠堿性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠堿性0酸酶試劑盒、小鼠堿性0酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
5-Benzimidazolecarboxylic acid 15788-16-6 中文名:5-苯并咪唑甲酸 分子式:C8H6N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠化酶elisa試劑盒 小鼠化酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠化酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠化酶試劑盒、小鼠化酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
5-Azacytidine 320-67-2 中文名:5-氮胞苷 分子式:C8H12N4O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒 96T/48T
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。