詳細介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:達氏疏螺旋體PCR檢測試劑盒
英文名稱:Borrelia duttoniiPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
腸道腺病毒40型PCR檢測試劑盒
腸道腺病毒41型PCR檢測試劑盒
出血性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
傳染性法氏囊病病毒PCR檢測試劑盒
實驗過程:
一、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
IgG 兔抗IgG 1mg
FYB: Fyn結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
胰島素樣生長因子-I抗體 Anti-IGF-I 0.1ml
Anti-PRCP/FITC 熒光素標記脯氨酰羧肽酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Rab24(Ser95) 0酸化ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-FITC Whole serum 兔抗熒光素抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 ,英文名: Apo-E ELISA Kit
小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒MouseIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T
人精氨酰-NA合成酶(RARS)免疫試劑盒 Human Arginyl-NA Syhetase,RARS ELISA Kit
RatAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞線粒體復(fù)合物V蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Mouseadrenomedullin,ADMELISA試劑盒小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
達氏疏螺旋體PCR檢測試劑盒5986-55-0百秋李醇說明書 Patchouli alcohol 豬粘膜血管地址素細胞黏附分子1(MADCAM1)試劑盒 Pig mucosal vascular addressin cell adhesion molecule 1,MADCAM1 ELISA kit
5957--80-2鼠尾草酚品牌 Carnosol 豬粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)試劑盒 Pig mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA Kit
5945-50-6水晶蘭苷說明書 Monotropein 豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)試劑盒 Pig mucin-5 subtype AC,MUC5AC ELISA Kit
5945-50-6水晶蘭苷品牌 Monotropein 豬粘蛋白/粘液素2(MUC2)試劑盒 Pig Mucin-2,MUC2 ELISA Kit
5940-00-1豯薟精醇規(guī)格 Darutigenol 豬粘蛋白/粘液素1(MUC1)試劑盒 Pig Mucin-1,MUC1 ELISA Kit
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。