詳細(xì)介紹
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株PCR檢測試劑盒 | Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)RTPCR | 50T |
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
定量PCR方法:
熒光定量PCR探針法 | 熒光定量PCR SYBR Green染料法 | 快速PCR | 多重 PCR |
探針法即除了引物外另外設(shè)置一個探針,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),這個時候,兩個平衡不發(fā)光,但是當(dāng)DNA通過引物合成的時候,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),兩個距離較遠(yuǎn),發(fā)光集團(tuán)產(chǎn)生熒光,被機(jī)器收集到信號,從而檢測基因的量 | 染料能夠與雙鏈結(jié)合,當(dāng)PCR擴(kuò)增的時候,染料結(jié)合到DNA上,從而發(fā)光,單個的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號,我們可以看出,染料法特異性不強(qiáng),只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光。 | 在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴(kuò)增,且不會影響擴(kuò)增產(chǎn)量和效率??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴(kuò)增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個結(jié)合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/2至1/3,卻能維持較高的擴(kuò)增效率。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,以進(jìn)一步縮短PCR時間。這一過程也被稱為 兩步PCR法。 | 多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應(yīng)管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。 |
相關(guān)產(chǎn)品:
利什曼原蟲通用PCR檢測試劑盒
熱帶利什曼原蟲PCR檢測試劑盒
同豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測試劑盒
通用PCR檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度
Goat Anti-Guinea IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
FAM123B: 腎母細(xì)胞瘤X蛋白抗體 0.2ml
成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體 Anti-CBFA1/RUNX2 0.1ml
Anti-Notch3/FITC 熒光素標(biāo)記跨膜受體蛋白Notch-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh POC5 細(xì)胞中心粒蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-TORC1/CRTC1/FITC 熒光素標(biāo)記環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠周期素依賴性抑制因子2A(CDKN2A)ELISA試劑盒 ,英文名: CDKN2A ELISA Kit
犬雙氫睪酮(DHT)ELISA檢測試劑盒CanineDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T
犬透明質(zhì)酸酶2(HAase 2)免疫試劑盒 Canine Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit
英文名稱HumaumornecrosisfactorβELISAKIT人腫瘤壞死因子β(TNFβ)規(guī)格:96T/48T
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解樣品制備試劑盒50次
RatgranzymesB,Gzms-BELISA試劑盒大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株PCR檢測試劑盒2-Amino-4-methylbenzothiazole 1477-42-5 中文名:2-氨基-4-并噻唑 分子式:C8H8N2S 度:98.0% 小鼠環(huán)0酸鳥苷 英文名稱: cyclic adenosine monophosphate 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: cGMP
2-Amino-4'-fluorobenzophenone 3800/6/4 中文名: 分子式:C13H10FNO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 英文名稱: ciliary neuroophic factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CF
2-Amino-4-chlorobenzothiazole 19952-47-7 中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 白細(xì)胞分化抗原14 英文名稱: cluster of differeiation aigen 14 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CD14
2-Amino-3-methylbenzoic acid 4389-45-1 中文名:2-氨基-3-甲酸 分子式:C8H9NO2 度:98.0% 可溶性細(xì)胞表面分化抗原40配體 英文名稱: Soluble Cluster of differeiation aigen 40 ligand 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: sCD40L
2-Amino-3-hydroxyanthraquinone 117-77-1 中文名:2-氨基-3-羥基蒽醌 分子式:C14H9NO3 度:98.0% 小鼠Aelisa試劑盒 小鼠A試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠A試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠A試劑盒、小鼠Aeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。