詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:和肽素免費(fèi)代測試劑盒說明
英文名稱:copeptin
檢測范圍:0.75pmol/L~24pmol/L
貨號:YS-E987493
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個(gè)月。
CCRF-CEM [CCRF CEM]急性細(xì)胞白血病T細(xì)胞 The CCRF-CEM [CCRF CEM] human acute lymphoblastic leukemia T lymphocytes 1640+10%Hyclone 滅活血清trans-Anethole茴香樟腦10克CP,98%
EGF Protein Human 重組 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)對基苯磺酸 Sulfanilic acid,≥99.0% 121-57-3 25G 通用試劑
293ET(胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞)) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml甘安醋 GLYCINqULTRcPURq 26-40-6
虹膜色素上皮細(xì)胞cDNAHIPEpiC cDNANEXTGEL5%SOLUTIONNEXT GEL 5%蛋白組學(xué)級透明無色液體RTsigma
小鼠骨髓間充質(zhì)肝細(xì)胞(MMSC-bm)(5×105)63231-69-6分子篩13X型MOLECULAR SIEVE
鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-LuSOBBROTHSOB 肉湯生物技術(shù)級淺米黃色粉末RT不sigma
MMP1 Others Human MMP1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 溴酚藍(lán);四溴酚磺酞 BroMophqnol bluq 112-39-9
CM-R044大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL蘇丹 B Sudan Black B (certified by the Biolog... 4197-25-5 5G 染色劑
SELP Others Human SELP / selectin P / P-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-TYROSINEL-酪酸美國藥典級100G60-18-4RT
小鼠胎兒成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL硅磚 C22Silocel brick C22
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 米氮平Mirtazapine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
兔骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells米氮平(標(biāo)準(zhǔn)品)Mirtazapine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SF-295細(xì)胞,XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞 毛霉 腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μg5-氟乳清酸;5-FOA5-Fluoroorotic acid,5-FOA質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
SF126(腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2枸櫞酸莫沙比利(標(biāo)準(zhǔn)品)Mosapride 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定
HCC827(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1枸櫞酸莫沙比利Mosapride 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR,二水合物
和肽素免費(fèi)代測試劑盒說明FLT1 Others Rat 大鼠 VEGFR1 / FLT-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (1RS)-1-(6-甲氧-2-萘基)乙醇(萘普生雜質(zhì)K)(1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol (Naproxen Impurity K)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
胎盤羊膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)6'-甲氧基-2'-萘乙酮 (萘普生雜質(zhì) L)6'-Methoxy-2'-acetonaphthone (Naproxen Impurity L)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Jurkat D,E細(xì)胞,T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 615小鼠癌瘤株,Ca759細(xì)胞 多聚賴氨酸10 mg/mlPLL(S)-普拉克索二鹽酸化物(S)-Pramipexole Di質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
NCI-H295R(腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(R)-普拉克索二鹽酸化物(R)-Pramipexole Di質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
C127(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M124小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]N-去甲基長春花堿N-Desmethyl Vinblastine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。*,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。