產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
儲存條件 | -20℃避光保存,避免反復(fù)凍融 | 分類 | PCR檢測試劑盒 |
鄰單胞菌通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Pleisiomonas spp.PCR
流感嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Haemophilus influenzaePCR
魯氏不動桿菌PCR
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-23 16:45:59瀏覽次數(shù):360
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 科研 |
儲存條件 | -20℃避光保存,避免反復(fù)凍融 | 分類 | PCR檢測試劑盒 |
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 規(guī)格 |
貓源性成分(Feline)核酸檢測試劑盒 | PCR檢測試劑盒 | 50T |
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
定量PCR方法:
熒光定量PCR探針法 | 熒光定量PCR SYBR Green染料法 | 快速PCR | 多重 PCR |
探針法即除了引物外另外設(shè)置一個探針,在探針的兩端分別帶上發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),這個時候,兩個平衡不發(fā)光,但是當(dāng)DNA通過引物合成的時候,探針被折斷,釋放出發(fā)光集團(tuán)和淬滅集團(tuán),兩個距離較遠(yuǎn),發(fā)光集團(tuán)產(chǎn)生熒光,被機(jī)器收集到信號,從而檢測基因的量 | 染料能夠與雙鏈結(jié)合,當(dāng)PCR擴(kuò)增的時候,染料結(jié)合到DNA上,從而發(fā)光,單個的染料不發(fā)光,這樣就能收集到信號,我們可以看出,染料法特異性不強(qiáng),只要是雙鏈的DNA都回結(jié)合發(fā)光。 | 在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴(kuò)增,且不會影響擴(kuò)增產(chǎn)量和效率??焖傺h(huán)條件尤其適用于具有高擴(kuò)增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個結(jié)合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/2至1/3,卻能維持較高的擴(kuò)增效率。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,以進(jìn)一步縮短PCR時間。這一過程也被稱為 兩步PCR法。 | 多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應(yīng)管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。 |
相關(guān)產(chǎn)品:
鯉春病毒血癥病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Spring Viraemia of Carp Virus(SVCV)RTPCR
鯉皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cyprinid Herpesvirus(CyHV)PCR
鯉皰疹病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cyprinid Herpesvirus (CyHVIII )3PCR
鯉皰疹病型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cyprinid Herpesvirus (CyHVII)2PCR
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度
小鼠生長分化因子15(GDF-15)ELISA試劑盒 ,英文名: GDF-15 ELISA Kit
雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測試劑盒ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 96T/48T
人5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgM)免疫試劑盒 Human 5-hydroxyyptamine/serotonin(5HT/ST)aibody(IgM)ELISA kit
英文名稱MouseIL-10ELISAKIT小鼠白介素10(IL-10)ELISAKIT規(guī)格:96T/48T
冰凍切片組織CDK2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
RatCollageypeⅡ,ColⅡELISA試劑盒大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-PCX/FITC 熒光素標(biāo)記足細(xì)胞特異蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-MK IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗猴IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
原依賴性癌基因蛋白抗體 anti-DJ-1 1ml
Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml
FCHSD1 英文名稱: FCHSD1蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-TRIM25(Ser100) 0酸化雌激素反應(yīng)指狀蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-MK IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗猴IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
貓源性成分(Feline)核酸檢測試劑盒大鼠酸性0酸酶1(ACP1)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP1 ELISA Kit
Mouse glycogen phosphorylase MM (GP-MM) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒
Ratbradykinin,BKELISAKit 大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforhiston-H2b(Mousehiston-H2b)ELISAKit小鼠組蛋白H2b規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞ROCK-II活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitColⅣ大鼠Ⅳ型膠原規(guī)格:48T/96T
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。