通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,僅供科研使用。
產(chǎn)品名稱 | 測(cè)定方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
檸檬酸合酶(CS)測(cè)試盒 | 微量法、可見(jiàn)分光光度法 | 100管/48樣、50管/24樣、25管/12樣 | BJ-01S85575 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
CS(EC 2.3.3.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)第一個(gè)限速酶,是三羧酸循環(huán)主要調(diào)控位點(diǎn)之一。
測(cè)定原理:
CS催化乙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生檸檬酰,進(jìn)一步水解產(chǎn)生檸檬酸;該反應(yīng)促使無(wú)色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
RING2/RNF2 環(huán)指2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Coxsackie Adenovirus Receptor 柯薩奇病毒受體B抗體 規(guī)格: 0.2ml
NFX1 核轉(zhuǎn)錄因子X(jué)盒結(jié)合1抗體 規(guī)格: 0.2mlPGGT1A/FNTA 香葉烯基轉(zhuǎn)移1α抗體 規(guī)格: 0.2ml
C9orf156 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框156抗體 0.1mlNEU4 神經(jīng)氨4抗體 規(guī)格: 0.2ml
TPST2 酪硫轉(zhuǎn)移2抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-NuMA (Ser395) 磷化核有絲分裂器NuMA抗體 規(guī)格: 0.1ml
Annexin II/Annexin A2 膜粘連 Ⅱ抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-MSK1 (Ser212) 磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-c-Abl(Ser735) 磷化非受體激c-Abl抗體 0.1ml
WDR26 心肌缺預(yù)處理正調(diào)節(jié)2抗體 規(guī)格: 0.2ml
MyD88 髓樣分化抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Met (Tyr1003) 磷化肝細(xì)胞生因子受體(原基因)抗體 規(guī)格: 0.1ml
檸檬酸合酶(CS)測(cè)試盒555-45-3豆蔻甘油三酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
522-97-4二氫小檗 規(guī)格: 20mg
153-18-4蘆丁;蕓香;蕓香葉;P;蘆丁蕓 規(guī)格: UV≥98%,20mg/支
6020-18-4黃連 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
大腸埃希氏菌 規(guī)格: 凍干粉
30220-46-3巨大戟; Ingel 規(guī)格: 20mg
148244-82-0亞木 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
右 規(guī)格: 100mg
549-21-3氧化小檗 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
486-86-2N-甲基野靛 規(guī)格: 20mg