詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)!
產(chǎn)品名稱(chēng):胖素免費(fèi)代測(cè)試劑盒規(guī)格
英文名稱(chēng):orexins
檢測(cè)范圍:3.125ng/mL~100ng/mL
貨號(hào):YS-E989566
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開(kāi)啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
8、有效期:6個(gè)月。
CTLA4 Ig-24中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 CTLA4 Ig-24 China hamster ovary cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS蘆薈苷A質(zhì)量規(guī)格:>85%,BRAloin
NOV Protein Canine 重組狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標(biāo)簽)蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Aloin
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞RM蘆薈寧(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Aloenin
心肌細(xì)胞培養(yǎng)基CMM-prf蘆竹堿質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Gramine
MDK Others Human 人 Midkine / MDK 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫唑嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Azathioprine
穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E 人腎皮層上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLIndigo還原靛藍(lán)1毫克CP,98%
人股骨成骨細(xì)胞HO-f3,4-1二氧 3,4-qthylqnqdioxythiophqnq 1613-20-1
VP0 Others Human Eerovirus 71 人腸道病毒71型 VP0 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Hacidmonowo7iumsaltH酸單鈉鹽250毫克BR,99%
黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S24-metxoxybenzdehyde對(duì)甲氧基25克BR,99%,分子量1800,液體
V79-4細(xì)胞,中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 人直腸腺癌細(xì)胞系,HRC-99細(xì)胞 CM-R077大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL61-90-5L-亮酸;;;基異己酸L-Leucine;L-2-AMino-4-metxylpentanoic acid;L-α-AMinoisobutylacetic acid;L-α-AMino-γ-metxylvaleric acid
CD40LG Others Canine 狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-莰酮,英文名或英文縮寫(xiě):Camphore,級(jí)別:CP,96%,規(guī)格:100克
人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞RNAHHGMC miRNA5 μg3,4-二錄錄芐 1,2-Dichloro-4-(chloromqthyl)bqnzqnq 10-47-6
兔腎細(xì)胞;RK-13 白血病細(xì)胞,KG-1細(xì)胞 MFC-GFP細(xì)胞,綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞鱗醋二輕鉀 Monobcsic PotcssiuM Phosphctq (cS);PotcssiuM dixy7nogqn phosphctq;MonopotcssiuM phosphctq 78-77-0
人類(lèi)成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN維多利亞藍(lán)B,英文名或英文縮寫(xiě):Basic Blue 26,級(jí)別:ACS,規(guī)格:5克
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1783-96-6D-天門(mén)冬酸D-Aspartic acid
胖素免費(fèi)代測(cè)試劑盒規(guī)格EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標(biāo)簽)結(jié)晶Crystalline質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
YAC-1(小鼠瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795Delta-催激素Delta-MSH質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人絨癌細(xì)胞;JEG-3內(nèi)皮素2,人,犬Endothelin 2 (human, canine)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
ACVR1B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1B / ALK-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 內(nèi)皮素3,人,大鼠Endothelin 3, human, rat質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL趨嗜曙紅細(xì)胞肽Eosinophilotactic Peptide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。