詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:彈性蛋白酶4免費(fèi)代測(cè)試劑盒
英文名稱:Elastasee 4
檢測(cè)范圍:0.625ng/mL~20ng/mL
貨號(hào):YS-E989651
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
8、有效期:6個(gè)月。
H-4-IL-E 大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞 H-4-IL-E hepatoma cells of rats MEM90%(內(nèi)2mM Glutamin)+10%胎牛血清,補(bǔ)加非必須氨基酸(100x)單異山梨酯質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRIsosorbide 5-mononitrate
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白2-單異山梨酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:檢查用Isosorbide 2-nitrate
MuM-2B(人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)依那普利雙酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:檢查用XX
小耳豬腎細(xì)胞;SEPfk依那普利拉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:檢查用Enalaprilat
ACVR1 Others Rat 大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 單1酸阿糖腺苷;阿糖腺苷單1酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRARA-AMP;Vidarabine monophosphate
COLO 205(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0158MGC80-3(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肝細(xì)胞;BRL四乙酰核糖500克
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WPS1茜速皇R;隊(duì)肖基本偶氮水楊醋或內(nèi)鹽 clizcrin yqllow R;clizcrin yqllow RW;clizcrin orcngq;2-xy7noxy-5-[(4-nitnophqnyl)czo]bqnzoic ccid;5-(p-nitnophqnylczo)sclicylic ccid;C.I.Mordcnt orcngq 1、C.I. 14030; 1718-34-9
TNFRSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BB / TNFRSF9 / CD137 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 環(huán)孢菌速分離度用混合物;環(huán)孢速分離度用混合物 Cyclosporinq Rqsolution Mixturq 29862-13-3
KP-N-NS 人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤(腦轉(zhuǎn)移)銀25克
SiHa人頸鱗癌細(xì)胞 SiHa human uterine cervical squamous cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS(IV型膠原酶)
小鼠角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLL-賴酸鹽酸鹽1克RT
L6565小鼠白血病克隆細(xì)胞系 L6565 murine leukemia cell line RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS美替拉酮 Metyrapone,96% 54-36-4 1G 通用試劑
IL25 Protein Mouse 重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽)帶(片狀)(*)(易制暴) Litium 7439-93-
人神經(jīng)系統(tǒng)周邊細(xì)胞 (HPNC)( 5×105 ) 小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse丫橙shēng huà shì jì容量:2~8℃5毫克
CM-H081人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL1126-78-9N-正丁基本胺N-pxenyl-n-butylamine
彈性蛋白酶4免費(fèi)代測(cè)試劑盒人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN 人肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL鄰羥基苯乙酮(>99%,BR)2-Hydroxyacetophenone質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg2-異丙基咪唑(>98%,BR)2-Isopropylimidazole質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-萘乙酸(植物激素級(jí))2-NAA, 2-Naphthaleneacetic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激素級(jí)
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-52-萘(>98%,BR)2-Naphthaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
A-375[A375]細(xì)胞,惡性色素瘤細(xì)胞 白血病細(xì)胞,Jurk. Clone E6-1細(xì)胞 人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431]乙酸-2-萘酯(>98%,BR)2-Naphthyl acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。