詳細(xì)介紹
末端轉(zhuǎn)移酶CAS號(hào):9027-67-2產(chǎn)品詳情:
末端轉(zhuǎn)移酶
英文名稱:TDT;Terminal Transferase;Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
其他名稱:末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶;胸腺五肽
CAS號(hào):9027-67-2
分子量:60000
級(jí)別:BR
來源:大腸桿菌細(xì)胞,含有編碼牛胸腺末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶的基因
濃度:20u/ul
活性定義:是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol脫氧核糖核酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物:66mM二甲胂酸鉀(PH7.2),1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP
保存液組分:100mM 醋酸鉀(PH6.8)、2mM β-巰基乙醇,0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油
5×反應(yīng)緩沖液:1M 二甲胂酸鉀、125mM Tris,0.05%(v/v) Triton X-100,5mM CoCL2(PH7.2,25℃)
抑制劑:金屬螯合劑、銨、氯化物、碘化物和磷酸鹽離子
失活:加入EDTA,70℃加熱10分鐘
質(zhì)量保證:測(cè)試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
注意:由于含有CoCL2,TdT反應(yīng)緩沖液不能與下游應(yīng)用兼容,需采用柱離心法或苯酚/氯方抽提及乙醇沉淀方法純化反應(yīng)混合物,除去CoCL2
性狀(以下信息僅供參考):懸浮液,重組酶。末端轉(zhuǎn)移酶(Terminal transferase, TdT)是一種無需模板的DNA聚合酶,催化脫氧核苷酸結(jié)合到DNA分子的3'羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子均可作為TdT的底物。一般操作是:先在載體上打開一單個(gè)位點(diǎn),把它與末端轉(zhuǎn)移酶和某一dNTP(如dATP)一起保溫以使添尾,另一待插入的外源DN片段則用互補(bǔ)的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接著使上述兩種都接上互補(bǔ)單鏈尾的DN片段彼此退火,使形成一雜合載體來轉(zhuǎn)化受體菌。雜合載體中的裂隙或切口可被受全菌所修復(fù)。
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)催化DNA的3'末端添加同聚物;DNA的3'末端標(biāo)記
保存:-20°C
末端轉(zhuǎn)移酶CAS號(hào):9027-67-2 公司主營:elisa試劑盒、ATCC細(xì)胞、微生物菌種、各種生化試劑、分子生物學(xué)、抗體、血清、熒光試劑盒等等??蛻?/span>可向我們咨詢您所需的產(chǎn)品、數(shù)量,我們誠摯希望能與您合作。
穩(wěn)定性判斷原則:
1.無機(jī)化合物,只要妥善保管,包裝完好無損,可以長(zhǎng)期使用。但是,那些容易氧化、容易潮解的物質(zhì),在避光、蔭涼、干燥的條件下,只能短時(shí)間(1~5年)內(nèi)保存,具體要看包裝和儲(chǔ)存條件是否合乎規(guī)定。
2.有機(jī)小分子量化合物一般揮發(fā)性較強(qiáng),包裝的密閉性要好,可以長(zhǎng)時(shí)間保存。但容易氧化、受熱分解、容易聚合、光敏性物質(zhì)等,在避光、蔭涼、干燥的條件下,只能短時(shí)間(1~5年)內(nèi)保存,具體要看包裝和儲(chǔ)存條件是否合乎規(guī)定。
3.有機(jī)高分子,尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料,極易受到微生物、溫度、光照的影響,而失去活性,或變質(zhì),故此,要冷藏(凍)保存,而且時(shí)間也較短。
4.基準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和高純物質(zhì),原則上要嚴(yán)格按照保存規(guī)定來保存,確保包裝完好無損,避免受到化學(xué)環(huán)境的影響,而且保存時(shí)間不宜過長(zhǎng)。一般情況下,基準(zhǔn)物質(zhì)必須在有效期內(nèi)使用。
試劑提純方法:
①蒸餾。對(duì)于易揮發(fā)的試劑,如常用的無機(jī)酸,有機(jī)溶劑等是最常用的提純方法。根據(jù)沸點(diǎn)的高低選用常壓或減壓蒸餾法。
②升華。對(duì)于某些易升華的試劑,如碘、萘等,此法最簡(jiǎn)便。
③重結(jié)晶。適用于大多數(shù)固體試劑的提純,其關(guān)鍵是選擇好合適的溶劑。
④溶劑萃取。無論將母體或雜質(zhì)萃取到有機(jī)溶劑相中,均可達(dá)到提純的目的。
⑤離子交換色譜分離。是一種新型的高效提純方法,例如,用陰離子交換樹脂吸附清除鹽酸中的鐵(FeCl4-)。此外,還有薄層層析、電滲析、區(qū)域熔融、離子交換膜等特殊手段來分離提純化學(xué)試劑。
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