相關(guān)產(chǎn)品:
小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(PM4)PCR檢測(cè)試劑盒 ,英文名: PM4
犬血栓前體蛋白(TpP)ELISA檢測(cè)試劑盒Caninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 50T
犬纖溶酶原激活物抑制劑1(SERPINE1)免疫試劑盒 Dog plasminogen activator inhibitor 1,SERPINE1
英文名稱humanHistamineELISAKIT人組胺(Histamine)
超氧化物歧化酶(SOD)標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定試劑盒5次
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:質(zhì)型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl)???1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
小鼠羧肽酶A3(CPA3)ELISA試劑盒 ,英文名: CPA3 ELISA Kit
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒guineapigIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
??扇苄?span>CD8(sCD8)免疫試劑盒 Bovine soluble cluster of differeiation 8,sCD8 ELISA Kit
英文名稱HumanBone-specificAlkphase-BELISAKit人骨特異性堿性0酸酶(ALP-B)規(guī)格:96T/48T
動(dòng)物糖解法糖基分解試劑盒20次
RatskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISA試劑盒大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Anti-Phospho-Nur77 (Ser351) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化孤兒核受體蛋白Nur77抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Rabbit IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗兔IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
E選擇素抗體 anti-E-Selectin 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗IgG 0.1ml
FAM82B 英文名稱: 微管相關(guān)蛋白FAM82B抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PLC β2/Phospholipase C beta 2 0酯酶Cβ2抗體 規(guī)格 0.2ml
Goat Anti-Rabbit IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗兔IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
質(zhì)型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒大鼠Bcl-2樣蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)ELISA試劑盒 ,英文名: Bcl2-L-1/Bcl-X ELISA Kit
Mouse bone morphogenetic protein 4 (BMP-4) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒
MouseFolicacid,FAELISAKit 小鼠(FA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumahyroglobulin,TGELISAKit人甲狀腺球蛋白規(guī)格:48T/96T
通用型亞鹽熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitPAPP-A大鼠相關(guān)血漿蛋白A規(guī)格:48T/96T