儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類(lèi)型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類(lèi),通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌最基本的分類(lèi)單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類(lèi)細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱(chēng)為該菌種的一個(gè)菌株。
培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
LRFN4 富含亮氨重復(fù)序列/Ⅲ型纖維連接4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) 磷化細(xì)胞質(zhì)膜微囊-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
c-ABL1/2(Tyr393/429) 磷化非受體激c-Abl抗體 規(guī)格: 0.1ml
Adenylate kinase 2/AK2 激1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-FoxO1 (Ser256) 磷化叉家族1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-PAK1/2/3(Thr423) 磷化p21激活激1/2/3抗體 規(guī)格: 0.1ml
API2 凋亡抑制因子2抗體 規(guī)格: 0.2mlGRIM19 干擾/維甲誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體 規(guī)格: 0.1ml
p55/DCAF1 染色質(zhì)組裝因子1P55抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-alpha Adducin(Ser726) 磷化內(nèi)收a1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Histone H3 (Di Methyl K27) 基化組H3抗體 規(guī)格: 0.1ml
ANTXR2 炭疽毒受體2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Fibrillarin 核仁纖維抗體 規(guī)格: 0.2mlRAB-14 RAS相關(guān)基因Rab14抗體 0.2ml
Serratiamarcescenssubsp.sakuensis價(jià)格藜蘆基;3,4-Dimethoxybe CAS 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
遼東楤木皂苷Ⅹ;Araloside X CAS 344911-90-6 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
啡酸乙酯;Ethyl caffeate CAS 102-37-4 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
姜;Zingerone CAS 122-48-5 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
環(huán)氧續(xù)隨子; Epoxylathyr CAS 28649-60-7 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
灰氈毛忍冬皂苷乙;Macranthoid CAS 136849-88-2 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
甘;Mannitol CAS 87-78-5 規(guī)格: 100mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
番瀉B;Sennidin B CAS 517-44-2 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
二氫槲皮素;Taxifolin CAS 480-18-2 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
;Cholesterol CAS 57-88-5 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
常山乙素;Febrifugine CAS 24159-07-7 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
醋戊曲酯 ;Acevaltrate CAS 25161-41-5 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
3-表熊果酸;3-Epiursolic CAS 989-30-0 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
扁蓄苷;avicularin CAS 572-30-5 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。