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          顆粒酶H(GZMH)重組蛋白

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          更新時(shí)間:2023-03-27 15:51:18瀏覽次數(shù):349

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
          英文名稱 Recombinant?Granzyme?H?(GZMH)? 物種 Homo?sapiens?(Human,人)?
          來源 原核表達(dá)? 應(yīng)用 Positive?Control;?Immunogen;?S
          顆粒酶H(GZMH)重組蛋白公司正在銷售的產(chǎn)品:小隱孢子蟲PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Cryptosporidium parvumPCR
          小鼠白血病病毒PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Mouse Leukemia Virus(MLV)RTPCR
          消化鏈球菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 腺伴隨病毒PCR檢測(cè)試劑

          詳細(xì)介紹

          僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱物種性狀來源
          顆粒酶H(GZMH)重組蛋白Homo sapiens (Human,人)凍干粉原核表達(dá)


          英文名稱:Recombinant Granzyme H (GZMH)    CCP-X; CGL-2; CSP-C; CTLA1; CTSGL2; Cathepsin G-Like 2,Protein h-CCPX; Cytotoxic T-lymphocyte proteinase; Cytotoxic serine protease C

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)    

          亞細(xì)胞定位::Cytoplasmic granule.

          預(yù)測(cè)分子量:29.2kDa

          實(shí)際分子量:29kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:Glu19~Leu246 (Accession # P20718) with

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點(diǎn):9.9

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


          標(biāo)簽選擇:

          親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

          b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

          c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

          d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

          e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

          f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

          g.      大量表達(dá)

          h.      親和純化

          i.        檢測(cè)和鑒定

          原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

          e.      蛋白表達(dá)小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

          GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)

            誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

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          注意事項(xiàng):

          1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

          相關(guān)產(chǎn)品:

          基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)重組蛋白    物種:Homo sapiens (Human,人)    英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)    CLG4; CLG4A; MMP-II; MONA; TBE-1; PEX; Gelatinase A; 72kDa Gelatinase; 72kDa Type IV Collagenase

          基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)重組蛋白    物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)    英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)    CLG4; CLG4A; MMP-II; MONA; TBE-1; PEX; Gelatinase A; 72kDa Gelatinase; 72kDa Type IV Collagenase

          基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)重組蛋白    物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)    英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)    CLG4; CLG4A; MMP-II; MONA; TBE-1; PEX; Gelatinase A; 72kDa Gelatinase; 72kDa Type IV Collagenase

          基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)重組蛋白    物種:Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔)    英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)    CLG4; CLG4A; MMP-II; MONA; TBE-1; PEX; Gelatinase A; 72kDa Gelatinase; 72kDa Type IV Collagenase

          基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白    物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)    英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)    SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1

          操作步驟 :

          根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

          b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

          c)對(duì)于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

          豬水泡病病毒PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Swine Vesicular Disease Virus(SVDV)RTPCR

          豬薩佩羅病毒PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Porcine Sapelovirus(PSV)RTPCR

          豬囊尾蚴PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Cysticercus cellulosaePCR

          豬鏈球菌型PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Streptococcus sui2PCR腸球菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Enterococcus spp.PCR

          腸炎沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Salmonella enteritidisPCR

          腸粘附性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Enteroadhesive E.Coli(EAEC)PCR

          腸致病性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Enteropathogenic E.coli(EPEC)PCR精氨酰tRNA合成酶抗體

          真核翻譯起始因子2C3抗體

          真核翻譯起始因子2C4抗體

          Rho GTP酶激活蛋白15抗體

          抑癌基因結(jié)合蛋白ARID1B抗體蛋白激酶A錨定蛋白95抗體

          自噬相關(guān)蛋白13抗體

          磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體

          腺苷酸激酶抗體

          神經(jīng)絲蛋白抗體單胞菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Pseudomonas spp.PCR

          顆粒酶H(GZMH)重組蛋白人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒     Human lymphotoxinα, LTA Elisa Kit    96T/48T

          人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒    Human CC-chemokine receptor 1, CCR1 Elisa Kit    96T/48T

          人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒    Human CX3C-chemokine receptor 1, CX3CR1 Elisa Kit    96T/48T

          人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒   

          人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒   

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