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          豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa試劑盒操作步驟

          閱讀:106          發(fā)布時間:2021-9-22

          豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa試劑盒操作步驟:


          1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

          2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

          3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

          4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

          5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

          6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

          7. 溫育:操作同3。

          8. 洗滌:操作同5。

          9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

          10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

          11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

          甲砜霉素(T1100000

          甲苯噻嗪 雜質(zhì)E(Y0000159

          甲苯噻嗪 雜質(zhì)C(Y0000158

          甲苯磺丁脲;甲糖寧(T1700000

          脊髓灰質(zhì)炎疫苗 (滅活 BRP (干冰運輸(P2160000

          脊髓灰質(zhì)炎疫苗 (口服 BRP (干冰運輸(P2161000

          左旋肉堿(L0 99900

          左旋咪唑:用于系統(tǒng)適用性試驗(Y0000047

          左旋咪唑 - 對照譜圖(Y0000048

          左旋甲狀腺素鈉(L0570000

          左旋多巴(L0400000

          左炔諾孕酮(L0551000

          左美丙嗪鹽酸鹽(L0500000

          左美丙嗪馬來酸鹽(L0505000

          左卡尼汀雜質(zhì)A;左旋肉毒堿雜質(zhì)A(L0 99905

          左卡巴斯汀雜質(zhì)D(L0 90008

          組胺磷酸鹽(H0700000

          棕櫚酸異丙酯(I0725000

          棕櫚酸(P0090000

          紫杉醇雜質(zhì)C(Y0000699

          紫杉醇(天然:用于峰鑒別試驗(Y0000700

          紫杉醇(半合成:用于系統(tǒng)適用性試驗(Y00007 9

          紫杉醇(半合成:用于峰鑒別試驗(Y0000719

          紫杉醇(Y0000698

          豬胰島素(I0 20000

          制霉菌素(N1400000

          脂蟾毒配基,蟾力蘇,酯蟾毒配基180555

          硬酯酸甲酯C18(M1770200

          硬脂酸膽固醇酯0 5805

          硬脂酸膽固醇酯0 5801

          茚地那韋:用于系統(tǒng)適用性試驗(Y0000746

          茚地那韋(Y0000788


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