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非紅細(xì)胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(mouse ACE)

小鼠雄激素結(jié)合蛋白(mouse ABP)

小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(mouse ACTH)

小鼠Active Caspase-3

小鼠Active Caspase-7

小鼠Active Caspase-8

小鼠激活素A(mouse Activin A)

小鼠脂聯(lián)素(mouse Adiponectin)

小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA)

小鼠抗核抗體(mouse ANA)

小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4)

小鼠骨成型蛋白受體1A(mouse BMP-R1A)

小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2)

小鼠腦鈉肽(mouse BNP)

小鼠N端前腦鈉素(mouse NT-proBNP)

小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP)

小鼠CXCL3(mouse CXCL-3)

小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)

小鼠皮質(zhì)酮(mouse Corticosterone)

小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2)

小鼠結(jié)締組織生長因子(mouse CTGF)

小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 (mouse CTLA-4)

小鼠細(xì)胞色素P450(mouse Cytochrome P450)

小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP)

小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)

小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)

小鼠CXCL1/KC(mouse KC)