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乳酸脫氫酶(LDH)測試盒洗滌方法
閱讀:224 發(fā)布時間:2021-11-23乳酸脫氫酶(LDH)測試盒洗滌方法:
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
脫硫弧菌脫硫亞種(脫硫微螺菌、脫硫螺菌、脫硫桿菌、脫硫芽孢弧菌、脫硫弧菌)
厭氧消化鏈球菌
銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)
纖維纖維微菌
長野解普魯蘭桿菌
變異鏈球菌
人蒼白桿菌
戊糖乳桿菌
菊糖芽孢乳桿菌
豇豆慢生根瘤菌
長雙歧桿菌
鰒發(fā)光桿菌
斯氏梭菌
嗜鹽四聯(lián)球菌
海蘇特氏菌
耐久腸球菌(堅韌鏈球菌)
海氏腸球菌
盲腸腸球菌
伴放線放線桿菌
類干酪乳桿菌類干酪亞種
嗜肺軍團菌
谷氨酸棒狀桿菌(黃色短桿菌)
發(fā)酵纖維單胞菌
長赤細(xì)菌
海洋鹽單胞菌
Georgenia muralis
河流弧菌
善變副球菌
干酪棒桿菌(乳酪棒桿菌)
沼澤紅假單胞菌
深紅紅螺菌
金黃色葡萄球菌金黃亞種
腸炎沙門氏菌亞利桑那亞種
類紅紅細(xì)菌
短短芽孢桿菌
腸膜明串珠菌
韓國叢毛單胞菌
土白蟻叢毛單胞菌