詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人胚胎心肌組織來源細(xì)胞;CCC-HEH-2培養(yǎng)
形態(tài)特性
品牌 貼壁生長
特征特性 取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織,該細(xì)胞由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:
3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚胎心肌組織來源細(xì)胞;CCC-HEH-2培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
VLA ELISA Kit 大鼠遲現(xiàn)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴磷酸化活化復(fù)制因子2(phospho ATF 2)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FADS1 脂肪酸去飽和酶1抗體 規(guī)格 0.2ml
KGF(Human Keratinocyte Growth Factor) ELISA Kit 人角化細(xì)胞生長因子 96T
2-Mar 英文名稱: 膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體 0.2ml
ATM 英文名稱: 毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 0.1ml
Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴磷酸化活化復(fù)制因子2(phospho ATF 2)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit 大鼠抗IVIgG抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ZNF268 鋅指脂蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh FTO/Protein fatso 脂肪堆積和肥胖相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
IGFBP2(Human insulin-like growth factors binding protein 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2 96T
Nidogen 2 英文名稱: 巢蛋白NID2抗體 0.2ml
APOBEC3B 英文名稱: 載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3B抗體 0.2ml
Anti-ZNF268 鋅指脂蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白4(LTBP4)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠整合素α2(ITGA2)ELISA試劑盒,英文名:ITGA2 ELISA Kit人3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)ELISA試劑盒,英文名:ALT ELISA Kit人白介素-37(Interleukin-37)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠補(bǔ)體成分5a受體1(C5aR1)ELISA試劑盒,英文名:C5aR1 ELISA Kit人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠Persephin蛋白(PSPN)ELISA試劑盒,英文名:PSPN ELISA Kit人激肽釋放酶6(KLK-6)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒,英文名:Ntn1 ELISA Kit人溶血磷脂酸受體4(LPAR4)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒,英文名:ANG ELISA Kit人髓性細(xì)胞核分化抗原(MNDA)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒,英文名:AQP-1 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Low-density lipoprotein receptor大鼠血清素(5-羥色胺)-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(AANAT)ELISA試劑盒,英文名:AANAT ELISA Kit人同源異形盒蛋白NANOG(Homeobox protein NANOG)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒,英文名:IgG ELISA Kit人的神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒,英文名:MMP-5 ELISA Kit人腦啡肽原B(Proenkephalin-B)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒,英文名:CA ELISA Kit人前阿片黑素細(xì)胞皮質(zhì)激素(POMC)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒,英文名:IL-13 ELISA Kit人Ras相關(guān)蛋白(RAB14) ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠5羥二十碳四烯酸(5-HETE)ELISA試劑盒,英文名:5-HETE ELISA Kit人斯鈣素2(STC-2)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠血幼素(HJV)ELISA試劑盒,英文名:HJV ELISA Kit
雜交袋(15×25cm) 100張/包 國產(chǎn)
ZFYVE27 英文名稱: 鋅指FYVE結(jié)構(gòu)域蛋白27抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Ser154) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
FoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DIAPH2 英文名稱: DIAPH2蛋白抗體 0.2ml
CCNA1 Cyclin A1 / CCNA1 鼠單抗 (PE) Human
bFGF-6(Human basic fibroblast growth factor 6) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GRP78 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體(熱休克蛋白70蛋白5)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MMP-8 基質(zhì)金屬蛋白酶-8抗體 規(guī)格 0.1ml
(MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7 96T
phospho-RASA1 (Tyr460) 英文名稱: 磷酸化Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
CRYZL1 英文名稱: 醌氧化還原酶樣蛋白1抗體 0.2ml
Anti-GRP78 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體(熱休克蛋白70蛋白5)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml