詳細(xì)介紹
人肺細(xì)胞;HLF-a價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人肺細(xì)胞;HLF-a價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性
培養(yǎng)條件
傳代方法
傳代情況 P86
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
FSH ELISA Kit 大鼠促卵泡素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-AT2R/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素Ⅱ-2型受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAIM2 FAS凋亡抑制分子2 規(guī)格 0.2ml
TBA ELISA Kit 大鼠總膽汁酸 96T
9-Mar 英文名稱: 膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體 0.2ml
phospho-ADAM17 (Thr735) 英文名稱: 磷酸化CD156b抗體 0.2ml
Anti-AT2R/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素Ⅱ-2型受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
XRCC1(X-ray Repair Cross Complementing 1) X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白/細(xì)胞堿基切除修復(fù)基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
anti-phospho-Beta-catenin(Tyr142) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCDHGB5 原鈣粘蛋白γB5抗體 規(guī)格 0.2ml
CDH1 Kit Human 人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
THSD1 英文名稱: 血小板跨膜反應(yīng)蛋白1抗體 0.2ml
Phospho-cdc2 (Tyr15) 英文名稱: 磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml
anti-phospho-Beta-catenin(Tyr142) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人載脂蛋白A-I結(jié)合蛋白(AI-BP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠乙酰輔酶A(acetyl-CoA)ELISA試劑盒,英文名:acetyl-CoA ELISA KiISA Kit for Human Protein Wnt-7a大鼠白介素28受體(IL28R)ELISA試劑盒,英文名:IL28R ELISA Kit大鼠Disabled同源物1(DAB1)ELISA試劑盒,英文名:DAB1 ELISA Kit豚鼠膽囊收素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒,英文名:CCK ELISA KiISA Kit for Allopregnanolone小鼠總蛋白C(TPC)ELISA試劑盒,英文名:TPC ELISA Kit人酯酰輔酶A合成酶家族成員4(ACSF4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒,英文名:OLAb ELISA KiISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 33小鼠褪黑素(MT)ELISA試劑盒,英文名:MT ELISA Kit
人花生四烯酸5脂加氧酶(5-lipoxygenase)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠糖類抗原125(CA125)ELISA試劑盒,英文名:CA125 ELISA Kit人脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/ml小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒,英文名:FK ELISA KiISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 15小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒,英文名:sEPCR ELISA Kit人腺病毒受體(CAR)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)ELISA試劑盒,英文名:CK-MM ELISA KiISA Kit for Human Signal transducer CD24小鼠芳香酶(ARO)ELISA試劑盒,英文名:ARO ELISA Kit人T細(xì)胞表面抗原CD2(T-cell surface antigen CD2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒,英文名:IL-6 ELISA KiISA Kit for Human T-cell surface glycoprotein CD4小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物(S100A8/A9)ELISA試劑盒,英文名:S100A8/A9 ELISA Kit
羊抗兔IgG血清 0.5ml 國(guó)產(chǎn)
Phospho-WNK1(Thr60) 英文名稱: 磷酸化賴酸缺陷型蛋白激酶1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 規(guī)格 0.1ml
HMGA2 (high mobility group A2) 高遷移率族蛋白A2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
dUTPase 英文名稱: 脫氧尿嘧啶三磷酸核苷水解酶抗體 0.1ml
Anti-AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TF(Human Transfer factor) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)移因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HIRA/DGGR1 組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Metronidazole(1C2) 甲硝唑單克隆抗體 規(guī)格 0.2ml
1,3- BetaD-Glu(Human 1,3- BetaD glucosidase) ELISA Kit 人1,3-βD葡葡糖苷酶 96T
RTP3 英文名稱: 受體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體 0.2ml
C6orf123 英文名稱: 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框123抗體 0.2ml
Anti-HIRA/DGGR1 組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml