人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL1培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細(xì)胞名稱  人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL1培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞為穩(wěn)定二倍體細(xì)胞。

培養(yǎng)條件 F12K 10%FBS

傳代方法 1:4-1:6，每周換液2-3次

傳代情況 P16

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

支原體檢測

STR Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:8；D16S539:9,11；D18S51:15；D21S11:31.2,32.2；D3S1358:15,17；D5S818:11,12；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:21,24；PentaD:9,14；PentaE:21；TH01:6,9；TPOX:8；vWA:16

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

人胚肺成纖維細(xì)胞；HFL1培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。

操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
HB-EGF(Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor) ELISA Kit 人肝素結(jié)合性表皮生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-G protein beta subunit GI G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml

MN(Human Mannose) ELISA Kit 人甘露糖 96T

ABCG8 英文名稱： 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體 0.2ml

CCK8 英文名稱： 膽囊收縮素8抗體 0.1ml

Anti-G protein beta subunit GI G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
XCR1(Human XC-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人XC趨化因子受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-/GLUR 谷胱甘肽還原酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2抗體 規(guī)格 0.1ml

MMP-4(Human matrix metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶4 96T

RUSC1 英文名稱： RUSC1抗體 0.1ml

Phospho-Caspase-9 (Ser196) 英文名稱： 磷酸化半胱酸蛋白酶9抗體 0.1ml

Anti-/GLUR 谷胱甘肽還原酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人異質(zhì)核糖核蛋白F (hnRNPF)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠骨成型蛋白7(BMP7)ELISA試劑盒，英文名：BMP7 ELISA KiISA Kit for Human D-Dimer小鼠血小板反應(yīng)蛋白3(THBS3)ELISA試劑盒，英文名：THBS3 ELISA KiISA Kit for Human High affinity immunoglobulin epsilon receptor subunit alpha小鼠雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶1A(DYRK1A)ELISA試劑盒，英文名：DYRK1A ELISA KiISA Kit for Human Galactocerebrosidase小鼠鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(SGLT1)ELISA試劑盒，英文名：SGLT1 ELISA KiISA Kit for Human Glial cell line-derived neurotrophic factor小鼠含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)ELISA試劑盒，英文名：vWA3A ELISA KiISA Kit for Human Basement membrane-specific heparan sulfate proteoglycan core protein小鼠蛋白C(PROC)ELISA試劑盒，英文名：PROC ELISA KiISA Kit for Human Insulin-like growth factor 1 receptor小鼠V-Myc骨髓細(xì)胞瘤病毒基因同源物(MYC)ELISA試劑盒，英文名：MYC ELISA Kit

ELISA Kit for Human Heat shock 70 kDa protein 1A/1B小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)ELISA試劑盒，英文名：HIF1α ELISA KiISA Kit for Human Potassium voltage-gated channel subfamily B member 2小鼠1號染色體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑盒，英文名：C1orf85 ELISA KiISA Kit for Human Laminin subunit gamma-2大鼠氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒，英文名：OxLDL ELISA KiISA Kit for Human Ghrelin O-acyltransferase大鼠銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒，英文名：CP ELISA KiISA Kit for Human Protein max大鼠尿微量白蛋白(MAU/ALB)ELISA試劑盒，英文名：MAU/ALB ELISA KiISA Kit for Human Nephrin大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒，英文名：Hpt/HP ELISA KiISA Kit for Human PHD finger protein 1大鼠肝細(xì)胞生長因子激活物(HGFA)ELISA試劑盒，英文名：HGFA ELISA Kit
羊抗人纖維蛋白原純化抗體 1mg/10mg 國產(chǎn)

14-3-3 epsilon 英文名稱： 14-3-3E蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Connexin 43(Ser368) 磷酸化Connexin 43蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DCAF12 英文名稱： 癌中心體相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

Anti-2,4-D 2，4-二氯苯氧乙酸(除草劑)單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human anti-IgA antibody ELISA Kit 人抗IgA抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-IL-17C 白介素-17C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Lxn/Latexin 羧肽酶抑制劑抗體 規(guī)格 0.1ml

1,5-AG(Human 1,5-anhydroglucitol) ELISA Kit 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨 96T

Renin 英文名稱： 腎素/血管緊張素形成酶Ren1抗體 0.1ml

CCL20/MIP3 alpha 英文名稱： 巨噬細(xì)胞炎性蛋白MIP-3a抗體 0.1ml

Anti-IL-17C 白介素-17C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。