詳細介紹
人羊膜細胞;HA價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 人羊膜細胞;HA價格
形態(tài)特性
品牌 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:12;D8S1179:12,13;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:18
同工酶
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-DISC1(NT)/FITC 熒光素標記DISC1 N端抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-MASP/FITC 熒光素標記抗MBL相關絲氨酸蛋白酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cactin/C19orf29 19號染色體開放閱讀框29抗體 規(guī)格 0.2ml
factor V(Vcoagulation factor) 凝血因子5抗體 0.5mg
Acetyl-Histone H2A(K5) 英文名稱: 乙?;M蛋白H2A抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh SENP5 泛素相關修飾蛋白特異性蛋白酶5抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-MASP/FITC 熒光素標記抗MBL相關絲氨酸蛋白酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
WWOX (WW domain-containing oxidoreductase) 包含氧化還原酶的WW域抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Caveolin-3 細胞質膜微囊蛋白-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHGC4 原鈣粘蛋白γC4抗體 規(guī)格 0.2ml
PDGFRB Kit Human 人 PDGFRb / CD140b ELISA配對抗體 ELISA
TSPY1 英文名稱: 特異定蛋白質編碼Y1抗體 0.1ml
Phospho-cdc25A (Ser76) 英文名稱: 磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
Anti-Caveolin-3 細胞質膜微囊蛋白-3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人胰腺再生蛋白1β(REG1β)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠脂肪酸去飽和酶1(FADS1)ELISA試劑盒,英文名:FADS1 ELISA Kit人ADP/ATP移位酶3(ADP/ATP translocase 3)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(vWFcp)ELISA試劑盒,英文名:vWFcp ELISA Kit人細胞因子信號轉導抑制因子2(SOCS-2)ELISA試劑盒人96T125-8000 pg/mL大鼠神經(jīng)元衍生孤兒受體1()ELISA試劑盒,英文名: ELISA Kit人T-box轉錄因子3(T-box protein 3)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠巨噬細胞炎性蛋白5(MIP5)ELISA試劑盒,英文名:MIP5 ELISA Kit人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠鈣粘蛋白EGF大鼠LAG七經(jīng)G-型受體2(CELSR2)ELISA試劑盒,英文名:CELSR2 ELISA Kit人腎母細胞瘤蛋白(Wilms tumor protein)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠白介素6受體(IL6R)ELISA試劑盒,英文名:IL6R ELISA Kit大鼠Ⅰ型膠原(COL1)ELISA試劑盒,英文名:COL1 ELISA Kit
人精胺氧化酶(Spermine oxidase)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠維甲酸受體α(RARα)ELISA試劑盒,英文名:RARα ELISA KiISA Kit for Human Carbonic anhydrase 14小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒,英文名:IL-13 ELISA Kit人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒,英文名:DNMT1 ELISA KiISA Kit for Human Collagen alpha-1(IV) chain小鼠二肽基肽酶IV(DPP4/CD26)ELISA試劑盒,英文名:DPP4/CD26 ELISA Kit人β-抵御素(Beta-defensin 119)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠中期因子(MK)ELISA試劑盒,英文名:MK ELISA KiISA Kit for Estradiol小鼠血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒,英文名:ANGⅡ ELISA Kit人原纖維蛋白3(Fibrillin-3)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠糖皮質激素受體α(GRα)ELISA試劑盒,英文名:GRα ELISA Kit
羊抗人IgM血清 0.5ml 國產(chǎn)
WWOX 英文名稱: 包含氧化還原酶的WW域抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Tyr170) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 規(guī)格 0.1ml
HLA-E (Human Leukocyte Anti-gen-E) 人類白細胞抗原EMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DcR3 英文名稱: 誘捕受體3抗體 0.1ml
Anti-AACT-Alpha1 α-1抗胰糜蛋白酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
ICAM- I 小鼠細胞間粘附因子-ⅠMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-FANCD2 FANCD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
12-HETE(Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid) ELISA Kit 人12羥二十烷四烯酸 96T
phospho-STAT5a(Tyr694) 英文名稱: 磷酸化信號轉導和轉錄激活因子5a抗體 0.1ml
C4orf32 英文名稱: 4號染色體開放閱讀框32抗體 0.2ml
Anti-FANCD2 FANCD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml