詳細(xì)介紹
人胚胎,皮膚,肌肉;M-20價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人胚胎,皮膚,肌肉;M-20價格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Rat visfatin 大鼠內(nèi)臟脂肪素Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-envelope glycoprotein (Dengue virus type-2) 登革熱病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NDUFA8 NADH脫氫酶α家族8抗體 規(guī)格 0.2ml
Human Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 人血纖蛋白原降解產(chǎn)物 96T
alpha + beta Synuclein 英文名稱: 核突觸蛋白α+β抗體 0.1ml
CD158e 英文名稱: NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體 0.2ml
Anti-envelope glycoprotein (Dengue virus type-2) 登革熱病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag標(biāo)簽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-8-OHdG 8-羥基脫氧鳥苷抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CK17 (Ser44) 磷酸化細(xì)胞角蛋白17抗體 規(guī)格 0.1ml
羊抗人IgG、IgM、IgA血清 0.6ml 國產(chǎn)
XRCC1 英文名稱: X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白抗體 0.1ml
DcR2 英文名稱: 誘捕受體2抗體 0.1ml
Anti-8-OHdG 8-羥基脫氧鳥苷抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人細(xì)絲增強(qiáng)子1(EF1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)ELISA試劑盒,英文名:ANX-IV ELISA Kit人胰腺再生蛋白1β(REG1β)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠脂肪酸去飽和酶1(FADS1)ELISA試劑盒,英文名:FADS1 ELISA Kit人精胺氧化酶(Spermine oxidase)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠維甲酸受體α(RARα)ELISA試劑盒,英文名:RARα ELISA Kit人沉默調(diào)節(jié)蛋白4(SIRT4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠尿皮質(zhì)素1(UCN1)ELISA試劑盒,英文名:UCN1 ELISA Kit人反式激活應(yīng)答RNA結(jié)合蛋白(TARBP2) ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL.大鼠核因子κB抑制因子β(IκBβ)ELISA試劑盒,英文名:IκBβ ELISA Kit人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠催產(chǎn)素受體(OXTR)ELISA試劑盒,英文名:OXTR ELISA Kit大鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒,英文名:Slit2 ELISA Kit
人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒,英文名:TIMP-2 ELISA Kit豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒,英文名:IL-12/P70 ELISA Kit人疑似陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶 13A2(ATP13A2)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒,英文名:TpP ELISA Kit人血清白蛋白(ALB)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/ml小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒,英文名:NSE ELISA Kit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1/β-分泌酶(BACE1/β-Secretase)ELISA試劑盒人96T0.78 ng/mL -50.0 ng/mL小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒,英文名:PCNA ELISA Kit人細(xì)胞周期蛋白-依賴的激酶12(CDK12)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒,英文名:Lep IgG ELISA Kit人胰彈性蛋白酶(ELA1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒,英文名:IL-2 ELISA Kit
溴化已錠染色液 -紅色 1ml Sigma原料,自產(chǎn)
Wnt1 英文名稱: 信號通路Wnt1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cdc25B (Ser149) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 規(guī)格 0.1ml
Inhibin Alpha 抑制素α抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Dynorphin A 英文名稱: 腦啡肽A抗體 0.2ml
Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LXA4(Human Lipoxin A4) ELISA Kit 人脂氧素A4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-PEA15 (Ser104) 磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HIV-1 ENV(gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
15-LO/LOX(Mouse 15-lipoxygenase) ELISA Kit 小鼠15脂加氧酶 96T
P4HB 英文名稱: 蛋白二硫鍵異構(gòu)酶P4HB抗體 0.2ml
phospho-CPI17 alpha (Thr38) 英文名稱: 磷酸化蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體 0.1ml
Anti-Phospho-PEA15 (Ser104) 磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml