詳細(xì)介紹
人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 WI-38人二倍體細(xì)胞系來(lái)自妊娠3個(gè)月的正常胚胎肺組織。 該細(xì)胞系是首株用于人類疫苗制備的人二倍體細(xì)胞系。 培液中添加TNF alpha可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(15+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Cys-C(Mouse Cystatin C) ELISA Kit 小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素CMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD56/NCAM1/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPY19L4 DPY19L4蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
TOXO IgM 弓形蟲抗體 IgM(間接法二步法)
alpha MSH 英文名稱: 促黑細(xì)胞激素α抗體 0.1ml
APOB48R 英文名稱: 載脂蛋白B受體抗體 0.2ml
Anti-CD56/NCAM1/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VMA(Human vanillylmandelic acid) ELISA Kit 人垂草扁桃酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MCT1 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh JMJD7 組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移酶JMJD7抗體 規(guī)格 0.2ml
Human schistosoma ELISA Kit 人血吸蟲 96T
Paralemmin 1 英文名稱: 細(xì)胞膜調(diào)控蛋白Paralemmin 1抗體 0.2ml
C3orf23 英文名稱: 3號(hào)染色體開放閱讀框23抗體 0.2ml
Anti-MCT1 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人細(xì)胞絨毛蛋白(CVL)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員10B(WNT10B)ELISA試劑盒,英文名:WNT10B ELISA KiISA Kit for Human Cold-inducible RNA-binding protein小鼠肌酐(Cr)ELISA試劑盒,英文名:Cr ELISA KiISA Kit for Human Calumenin小鼠程序性死亡1(PD-1)ELISA試劑盒,英文名:PD-1 ELISA KiISA Kit for Human Complement factor I小鼠P選擇素糖蛋白配體1(PSGL-1)ELISA試劑盒,英文名:PSGL-1 ELISA KiISA Kit for Human C-C motif chemokine 19小鼠白細(xì)胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒,英文名:IL-21 ELISA KiISA Kit for Human Dickkopf-related protein 1小鼠血小板因子4(PF4)ELISA試劑盒,英文名:PF4 ELISA KiISA Kit for Human Frizzled-3小鼠絲切蛋白1(CFL1)ELISA試劑盒,英文名:CFL1 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Ficolin-3小鼠神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒,英文名:NSE ELISA KiISA Kit for Glutathione小鼠內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)ELISA試劑盒,英文名:ITLN1 ELISA KiISA Kit for Human Glutamate decarboxylase 2小鼠核糖核酸酶T2(RNASET2)ELISA試劑盒,英文名:RNASET2 ELISA KiISA Kit for Human Heparanase小鼠蛋白激酶Cε(PKCε)ELISA試劑盒,英文名:PKCε ELISA KiISA Kit for Human Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H5-like protein小鼠X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)ELISA試劑盒,英文名:XRCC6 ELISA KiISA Kit for Human ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10小鼠50kDa核孔蛋白(NUP50)ELISA試劑盒,英文名:NUP50 ELISA KiISA Kit for Human Laminin subunit beta-2大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒,英文名:TAP ELISA Kit
小鼠抗b-Actin 20ul 進(jìn)口分裝
ZNRF1 英文名稱: 鋅指/環(huán)指蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cyclin E(Thr62) 磷酸化周期素E抗體 規(guī)格 0.1ml
GLI1(GLI-Kruppel family member 1) 下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DAL1 英文名稱: 細(xì)胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗體 0.2ml
IFNAR2 IFNAR2 鼠單抗 (PE) Human
ERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
精氨酸加壓素受體2抗體 Anti-AVPR2 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR (Tyr1101) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
1640培養(yǎng)液 250ml 國(guó)產(chǎn)
ZNT8 英文名稱: 鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8蛋白抗體 0.2ml
DTNB 英文名稱: 肌Dystrobrevin β蛋白抗體 0.2ml
精氨酸加壓素受體2抗體 Anti-AVPR2 0.1ml