細胞名稱  人二倍體細胞；HEL培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細胞樣　

品牌 貼壁生長

特征特性 HEL是一株人二倍體細胞系，具有典型的成纖維細胞形態(tài)，染色體2n＝46?？捎糜谧鞫喾N病毒的宿主，抗衰老藥物試驗等。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C19

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR STR鑒定

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
人二倍體細胞；HEL培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
F VII (Human coagulation factor VII ) ELISA Kit 人凝血因子ⅦMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HDLBP/vigilin 高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

INH-A ELISA Kit 大鼠抑制素A 96T

AMPKγ2 英文名稱： 腺苷單磷酸活化蛋白激酶γ2抗體 0.2ml

C2orf49 英文名稱： 2號染色體開放閱讀框49抗體 0.2ml

Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
VK1 ELISA Kit 大鼠維生素K1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-ADRA2/FITC 熒光素標記alpha-2腎上腺素能受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FECH/Ferrochelatase 鐵螯合酶抗體 規(guī)格 0.2ml

HL ELISA Kit 大鼠肝脂酶 96T

MYBPC1 英文名稱： 肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體 0.2ml

AX2R 英文名稱： 膜粘連蛋白2受體抗體 0.2ml

Anti-ADRA2/FITC 熒光素標記alpha-2腎上腺素能受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人維生素D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠抗肌萎蛋白(UTRN)ELISA試劑盒，英文名：UTRN ELISA Kit人高爾基蛋白73(GP73)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒，英文名：CRYαB ELISA Kit人E3泛素蛋白連接酶HUWE 1(E3 ubiquitin-protein ligase HUWE1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒，英文名：GAPDH ELISA KiISA Kit for Human Nicotinamide phosphoribosyltransferase大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒，英文名：CT ELISA Kit吡啶酚(Pyridinoline)ELISA試劑盒通用96T6.25-400 nmol/L大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒，英文名：BMPR-Ⅱ ELISA KiISA Kit for Human Xaa-Pro dipeptidase大鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒，英文名：PRG4 ELISA Kit人前胸腺素α（Prothymosin alpha）ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒，英文名：IL-2sRβ ELISA Kit

人β氨基己糖苷酶β(HEXB)ELISA試劑盒人96T1.56-100 U/mL小鼠干擾素γ誘導單核因子(MIγ)ELISA試劑盒，英文名：MIγ ELISA KiISA Kit for Human Pyruvate kinase isozymes M1/M2大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒，英文名：NAG ELISA Kit人蛋白信號調(diào)節(jié)因子1(RGS1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠粒細胞巨噬細胞集落激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒，英文名：GMCSF/CSF2 ELISA KiISA Kit for Human Syntenin-1大鼠音猬因子(SHH)ELISA試劑盒，英文名：SHH ELISA Kit人鋅指蛋白2(SNAI2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠細胞絨毛蛋白(CVL)ELISA試劑盒，英文名：CVL ELISA KiISA Kit for Human Serpin B3大鼠神經(jīng)生長因子誘導蛋白B(NGFIB)ELISA試劑盒，英文名：NGFIB ELISA Kit人皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白ELISA試劑盒人96T39-2500 nmol/L大鼠硫酸肝素蛋白聚糖(HSPG)ELISA試劑盒，英文名：HSPG ELISA Kit
纖維素膜(15×60cm 0.45um) 1張 Pall-Gelman

ZNF312 英文名稱： 鋅指蛋白312抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-DDX58 (Ser8) 磷酸化DDX58抗體 規(guī)格 0.1ml

GAD-67 (glutamate decarboxylase 67) 谷氨酸脫羧酶-67抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DCIR/CLEC4A 英文名稱： C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體 0.2ml

CLEC7A Dectin-1 / CLEC7A 兔單抗 (PE) Mouse
Human thyroxineT4 ELISA Kit 人甲狀腺素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基爾曼氏細小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端 規(guī)格 1ml

17-OHP ELISA Kit 大鼠17羥孕酮 96T

Protein C inhibitor 英文名稱： 蛋白C抑制因子抗體 0.1ml

CD4 英文名稱： CD4抗體 0.1ml

Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。