詳細介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0902價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0902價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-HBsAg/FITC 熒光素標(biāo)記山羊抗人乙肝表面抗原抗體 IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
氧化還原因子1抗體 Anti-APEX1/Ref-1 0.1ml
ZO-1 英文名稱: 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體(閉鎖小帶蛋白1) 0.1ml
DBF4A 英文名稱: S期激酶活化蛋白DBF4A抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr331) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體 規(guī)格 0.1ml
DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Beta-Actin β-肌動蛋白抗體(內(nèi)參抗體)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser259) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗大鼠IgG純化抗體 1mg/10mg 國產(chǎn)
YAP1 英文名稱: 原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
DPYD 英文名稱: 二氫嘧啶脫氫酶抗體 0.2ml
Anti-Beta-Actin β-肌動蛋白抗體(內(nèi)參抗體)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人多巴色素異構(gòu)酶(DT)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒,英文名:IGFBP2 ELISA KiISA Kit for Human Cyclin-dependent kinase 5小鼠DAB2互作蛋白(DAB2IP)ELISA試劑盒,英文名:DAB2IP ELISA Kit人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒人96T3.12-200 ng/mL小鼠二肽基肽酶4(DPP4/CD26)ELISA試劑盒,英文名:DPP4/CD26 ELISA KiISA Kit for Human Beta-defensin 119小鼠中間α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)ELISA試劑盒,英文名:ITIH5 ELISA Kit人內(nèi)源性波納病毒樣核蛋白1(EBLN1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)ELISA試劑盒,英文名:AngⅠ ELISA KiISA Kit for Human Fibrillin-3小鼠糖抗原125(CA125)ELISA試劑盒,英文名:CA125 ELISA Kit人叉頭框蛋白03(FoxO3)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠熱休克蛋白β2(HSPβ2)ELISA試劑盒,英文名:HSPβ2 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Epithelial cell adhesion molecule小鼠吻素1(KISS1)ELISA試劑盒,英文名:KISS1 ELISA KiISA Kit for Human Embryonic growth/differentiation factor 1小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒,英文名:PCK1 ELISA Kit人離子型N-甲基D-天冬氨酸谷氨酸受體(GRIN1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠回腸脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP6)ELISA試劑盒,英文名:FABP6 ELISA KiISA Kit for Human Hemopexin小鼠鈣蛋白酶10(CAPN10)ELISA試劑盒,英文名:CAPN10 ELISA Kit人泛素樣蛋白ISG15(Ubiquitin-like protein ISG15)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠成纖維細胞生長因子13(FGF13)ELISA試劑盒,英文名:FGF13 ELISA KiISA Kit for Human Integrin alpha-L小鼠β-血小板球蛋白(βTG)ELISA試劑盒,英文名:βTG ELISA Kit人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)ELISA試劑盒,英文名:DNASE1L3 ELISA Kit
山羊SP(HRP)試劑盒 140片 進口原料
UROD 英文名稱: 尿卟啉原脫羧酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATF4/CREB-2(Ser245) 磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體 規(guī)格 0.1ml
NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1) 谷氨酸受體1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DICER1 英文名稱: 核糖核酸酶Dicer抗體 0.1ml
Anti-AKR1B1 醛糖還原酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
C1INH(Human Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit 人補體1抑制物抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Rad51 Rad51抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Haptoglobulin beta 結(jié)合球蛋白β抗體 規(guī)格 0.2ml
A Beta1-40 ELISA Kit 大鼠β淀粉樣蛋白1-40 96T
P2Y2 英文名稱: 嘌呤ATP受體抗體 0.2ml
phospho-BCAR1(Tyr410) 英文名稱: 磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體 0.1ml
Anti-Rad51 Rad51抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml