詳細介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0910價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0910價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一少精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;5-6天一次
傳代情況 P4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-CD97/FITC 熒光素標(biāo)記CD97抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Calcitonin peptide 降鈣素抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
腺苷受體A3抗體 Anti-ADORA3/A3AR 0.1ml
ZNF426 英文名稱: 鋅指蛋白426抗體 0.2ml
DC-SIGN 英文名稱: 細胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FAK(Tyr925) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Calcitonin peptide 降鈣素抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
UPAR 人凝血酶受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Connexin-32 間隙連接蛋白32抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Nicastrin 老年性癡呆蛋白APH2抗體 規(guī)格 0.1ml
Human Ig-like transcripts Receptor,ILTsR ELISA Kit 人免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體受體 96T
TNFRSF5 英文名稱: 壞死因子受體超家族成員5抗體 0.1ml
Claudin 22 英文名稱: 緊密連接蛋白22抗體 0.1ml
Anti-Connexin-32 間隙連接蛋白32抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白11(LRP-11)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒,英文名:MUC5AC ELISA Kit人多巴胺β-羥化酶ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠胰淀素(IAPP)ELISA試劑盒,英文名:IAPP ELISA KiISA Kit for Human Ephrin-A1小鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA試劑盒,英文名:SEPP1 ELISA Kit人N甲酰基氨酸受體2(N-formyl peptide receptor 2)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠腎上腺素能受體α1A(ADRα1A)ELISA試劑盒,英文名:ADRα1A ELISA KiISA Kit for Human Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3小鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)ELISA試劑盒,英文名:LOX1 ELISA Kit人磷脂酰肌醇蛋白聚糖2(GPC2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠膠質(zhì)細胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒,英文名:GDNF ELISA KiISA Kit for Human Hematopoietic prostaglandin D synthase小鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)ELISA試劑盒,英文名:TNNT1 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Lysophosphatidic acid receptor 3大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒,英文名:HO-1 ELISA Kit人糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)ELISA試劑盒人96T7.8-500 ng/mL小鼠淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒,英文名:Aβ1-40 ELISA KiISA Kit for Human Interleukin enhancer-binding factor 3小鼠白介素8受體β(IL8Rβ)ELISA試劑盒,英文名:IL8Rβ ELISA Kit人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)ELISA試劑盒,英文名:S100A9 ELISA KiISA Kit for Human Tyrosine-protein kinase JAK1小鼠ⅡD組磷脂酶A2(PLA2G2D)ELISA試劑盒,英文名:PLA2G2D ELISA Kit人白細胞細胞化學(xué)吸引素2(LECT2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)ELISA試劑盒,英文名:ITG αM/CD11b ELISA KiISA Kit for Human Alpha-lactalbumin大鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒,英文名:CH50 ELISA Kit
人血清IgA液體(70-80%) 10mg 國產(chǎn)
WAVE 1 英文名稱: 富含脯酸同源蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN2A/P16 (Ser152) 磷酸化抑癌基因p16抗體 規(guī)格 0.1ml
IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
phospho-Desmin (Thr16) 英文名稱: 磷酸化結(jié)蛋白抗體 0.1ml
Anti-ACEI 血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
IGFBP-4 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-alpha Adaptin/FITC 熒光素標(biāo)記銜接蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM81A FAM81A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
A Beta1-42(Mouse amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit 小鼠β淀粉樣蛋白1-42 96T
MCT1 英文名稱: 單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體 0.1ml
phospho-ALK (Tyr1278 + Tyr1282 + Tyr1283) 英文名稱: 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 0.1ml
Anti-alpha Adaptin/FITC 熒光素標(biāo)記銜接蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml