詳細(xì)介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一無精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-WBSCR14/ChREBP /FITC 熒光素標(biāo)記糖類應(yīng)答元件結(jié)合蛋白ChREBP抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 Anti-ATM 0.1ml
ZNF575 英文名稱: 鋅指蛋白575抗體 0.2ml
Deltex 1 英文名稱: DTX1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR(Tyr845) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
uPA/PLAU(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人尿激酶型纖溶酶原激活物Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-eNOS (Thr495) 磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IKI3 family protein 擬南芥IKI3抗體 規(guī)格 0.2ml
ISR- Beta(Mouse Insulin Receptor Beta) ELISA Kit 小鼠胰島素受體β 96T
PI 3 Kinase Class 3 英文名稱: 磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體 0.1ml
CTGF 英文名稱: 結(jié)締組織生長因子抗體 0.1ml
Anti-Phospho-eNOS (Thr495) 磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶ⅠELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠尿激酶(UK)ELISA試劑盒,英文名:UK ELISA KiISA Kit for Human Corticotropin-releasing factor receptor 1小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒,英文名:α-glucosidase ELISA KiISA Kit for Human Cytochrome P450 2B6小鼠可溶性CD80(sCD80)ELISA試劑盒,英文名:sCD80 ELISA KiISA Kit for Human Dexamethasone-induced protein小鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒,英文名:INHBP ELISA KiISA Kit for Fructosamine小鼠同型半胱氨酸(HA)ELISA試劑盒,英文名:HA ELISA KiISA Kit for Human Vascular endothelial growth factor D小鼠旁血小板溶蛋白(PPL)ELISA試劑盒,英文名:PPL ELISA KiISA Kit for Human Granzyme B小鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)ELISA試劑盒,英文名:CKMB ELISA Kit
人誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/ml大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒,英文名:AR ELISA KiISA Kit for Human Hornerin小鼠多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試劑盒,英文名:VS ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-32小鼠白介素12A(IL12A)ELISA試劑盒,英文名:IL12A ELISA KiISA Kit for Human Intercellular adhesion molecule 1小鼠ADP核糖轉(zhuǎn)移酶1(ART1)ELISA試劑盒,英文名:ART1 ELISA KiISA Kit for Human Lysophosphatidylcholine acyltransferase 2大鼠抑瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒,英文名:OSMR ELISA KiISA Kit for Human Mediator of RNA polymerase II transcription subunit 31大鼠細(xì)胞分裂周期基因(CDC)ELISA試劑盒,英文名:CDC ELISA Kit人唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素10(Siglec-10)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠血管生成素4(ANGPT4)ELISA試劑盒,英文名:ANGPT4 ELISA Kit
人白蛋白干粉 10mg/50mg 國產(chǎn)
TCAB1 英文名稱: 端粒酶卡哈爾體蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr157) 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-12(Interleukin-12)human peptide 白介素12抗原(人)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DAAM1 英文名稱: 形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體 0.1ml
Anti-AchE 乙酰膽堿酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PMN Elastase(Human Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit 人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-eNOS (Ser113) 磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IKIP IKK激酶相互作用蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
A1c(Mouse Glycated hemoglobin A1c) ELISA Kit 小鼠糖化血紅蛋白A1c 96T
phospho-PIK3C3(Ser676) 英文名稱: 磷酸化磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體 0.1ml
CTLA4 英文名稱: 細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4抗體 0.2ml
Anti-Phospho-eNOS (Ser113) 磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml