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          EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928培養(yǎng)

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          • 品牌 ATCC
          • 廠商性質 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2018-04-18 13:47:54瀏覽次數(shù):287

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術指導。歡迎廣大科研用戶!

          詳細介紹

          細胞名稱  EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928培養(yǎng)
          形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

          品牌 懸浮生長

          特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。

          培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

          傳代方法 1:

          2傳代;5-6天一次  

          傳代情況 P2

          凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

          支原體檢測 熒光法(-) 

          STR -

          同工酶

          染色體

          使用權限 A類

          EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928培養(yǎng)操作流程:
          1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
          1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
          1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
          1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
          1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
          1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
          1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。 
          1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
          貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
          懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
          Anti-Z-DEVD-FMK/FITC 熒光素標記CASPASE3凋亡抑制劑IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Cyclin D2 周期素D2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          β淀粉樣肽β-Amyloid 1-40/Aβ1-40 C端抗體 Anti-β-Amyloid 1-40/Aβ1-40 0.1ml

          ZNF379 英文名稱: 鋅指蛋白379抗體 0.2ml

          Desmoglein 3 英文名稱: 橋粒芯蛋白3抗體 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-Ezrin (Tyr353) 磷酸化埃茲蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

          Cyclin D2 周期素D2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
          UK(Human urokinase) ELISA Kit 人尿激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

          Anti-Nebulin 伴肌動蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh IL-3(human) 白介素3抗體(人) 規(guī)格 0.2ml

          TXB2(Mouse Thromboxane B2) ELISA Kit 小鼠血栓素B2 96T

          plant lectin B4 英文名稱: 植物凝集素IB4 0.2ml

          Complement C3 英文名稱: 過敏毒素C3(補體C3)抗體 0.1ml

          Anti-Nebulin 伴肌動蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          人成纖維細胞生長因子9(FGF-9)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒,英文名:uPA ELISA KiISA Kit for Human Prostate androgen-regulated mucin-like protein 1大鼠促性腺激素抑制激素(GnIH)ELISA試劑盒,英文名:GnIH ELISA KiISA Kit for Human N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain大鼠α干擾素(IFNα)ELISA試劑盒,英文名:IFNα ELISA KiISA Kit for Human Reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs大鼠CXC趨化因子配體1(CXCL1)ELISA試劑盒,英文名:CXCL1 ELISA KiISA Kit for Human Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 1大鼠硝基酪氨酸(NT)ELISA試劑盒,英文名:NT ELISA KiISA Kit for Human Secretin大鼠乳酸脫氫酶A(LDHA)ELISA試劑盒,英文名:LDHA ELISA KiISA Kit for Human Tribbles homolog 3大鼠激肽釋放酶5(KLK5)ELISA試劑盒,英文名:KLK5 ELISA Kit

          ELISA Kit for Human Glutamate--cysteine ligase catalytic subunit小鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒,英文名:TBG ELISA KiISA Kit for Human Metalloproteinase inhibitor 2大鼠兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)ELISA試劑盒,英文名:COMT ELISA KiISA Kit for Human Protein Wnt-5a大鼠白介素12A(IL12A)ELISA試劑盒,英文名:IL12A ELISA Kit豚鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒,英文名:SAA ELISA KiISA Kit for Human Apolipoprotein L1小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒,英文名:AChRab ELISA KiISA Kit for Human Arachidonate 15-lipoxygenase B小鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒,英文名:CA-2 ELISA KiISA Kit for Human Beta-1, 3-galactosyltransferase 2小鼠輪狀病毒(RV)抗原(Ag)ELISA試劑盒,英文名:Ag ELISA Kit
          切片盒 100片

          WSTF 英文名稱: 轉錄因子WSTF抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-CDC42 (Ser71) 磷酸化細胞分化周期CDC42蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

          IL-4(Interleukin-4)human peptide 白介素4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Dymeclin 英文名稱: 迪格弗-梅爾基奧爾-克勞森綜合征相關蛋白抗體 0.2ml

          Anti-ADAMTS7 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          Anti-HIF-1 Beta/ARNT1/FITC 熒光素標記缺氧誘導因子1β 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Anti-phospho-ERK1(pThr202/pThr204)+phospho ERK2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光素標記抗人、大、小鼠磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh ATXN1/Ataxin-1 脊髓小腦失調癥蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

          AACT(Alpha-1-Anti-chymotrypsin) α-1抗胰糜蛋白酶 10mg

          GPR39 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體39抗體 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格 0.1ml

          Anti-phospho-ERK1(pThr202/pThr204)+phospho ERK2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光素標記抗人、大、小鼠磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

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