詳細介紹
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0926價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0926價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171)/FITC 熒光素標記磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
銜接蛋白α抗體 Anti-alpha Adaptin/AP1 0.1ml
ZBTB26 英文名稱: 鋅指蛋白481抗體 0.2ml
DGCR6 英文名稱: 無胸腺癥相關(guān)蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關(guān)鍵基因6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ERK1(Thr197/Thr202) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 規(guī)格 0.1ml
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
UGT2B4(Human uridine dipho-sphate glucuronosyltransferase 2 family polypeptide B4) ELISA Kit 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖細胞核抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HN protein 雞新城疫血凝素-神經(jīng)氨酸酶抗體 規(guī)格 1ml
CH ELISA Kit (Mouse cholest) 小鼠膽固醇ELISA試劑盒 96T
Plastin L 英文名稱: 淋巴細胞胞漿蛋白LCP1抗體 0.2ml
CT26 英文名稱: /抗原26抗體 0.2ml
Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖細胞核抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人成纖維細胞生長因子4(FGF-4)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠尿皮質(zhì)素3(UCN3)ELISA試劑盒,英文名:UCN3 ELISA KiISA Kit for Human Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial大鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒,英文名:DHEA ELISA KiISA Kit for Human Myelin-oligodendrocyte glycoprotein大鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒,英文名:F1+2 ELISA KiISA Kit for Human Neurotensin/neuromedin N大鼠緊密連接蛋白(Ocln)ELISA試劑盒,英文名:Ocln ELISA KiISA Kit for Human Periaxin大鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒,英文名:SCFR ELISA KiISA Kit for Human Peroxiredoxin-6大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒,英文名:ALCAM ELISA KiISA Kit for Human Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9大鼠CD44分子(CD44)ELISA試劑盒,英文名:CD44 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Glucosylceramidase小鼠堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)ELISA試劑盒,英文名:FGF2 ELISA KiISA Kit for Human Pulmonary surfactant-associated protein D大鼠早老素2(PS2)ELISA試劑盒,英文名:PS2 ELISA KiISA Kit for Human Synaptophysin大鼠銅伴侶超氧化物歧化酶(SOD4)ELISA試劑盒,英文名:SOD4 ELISA KiISA Kit for Human Sphingosine 1-phosphate receptor 2大鼠內(nèi)皮素受體A(ETRA)ELISA試劑盒,英文名:ETRA ELISA KiISA Kit for Human Trem-like transcript 1 protein大鼠核連蛋白1(NUCB1)ELISA試劑盒,英文名:NUCB1 ELISA KiISA Kit for Human Ubiquitin-associated protein 2大鼠成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒,英文名:FGFR1 ELISA Kit大鼠Podocin蛋白(PDCN)ELISA試劑盒,英文名:PDCN ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注
ZW10 peptide 英文名稱: 著絲粒蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-DAXX (Ser517) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
GAPDH 3-磷酸甘油醛脫氫酶(人)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DDB1 英文名稱: DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
CSF2RA CD116 / GM-CSFR 鼠單抗 (PE) Human
25(OH)D3/25 HVD3(Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3) ELISA Kit 小鼠25羥基維生素D3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CSMD1/FITC 熒光素標記抑癌基因CSMD1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DDX19B/DBP5 解旋酶DEAD5抗體 規(guī)格 0.1ml
AACT/APC 熒光素APC標記胰糜蛋白酶 0.1ml
LACE1 英文名稱: 泌乳升高蛋白1抗體 0.2ml
磺胺對甲氧嘧啶單克隆抗體 小鼠單抗 0.1
Anti-CSMD1/FITC 熒光素標記抑癌基因CSMD1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml