詳細介紹
人T淋巴瘤細胞;H9價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 人T淋巴瘤細胞;H9價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 H9細胞是HUT78(ATCC TIB 161)的克隆系(Callo,R C,et al)。細胞表面帶有CD3、CD4標記。研究表明,該細胞系對人體免疫缺陷病毒(HIV-1)敏感,可用于檢測、分離和增殖HIV-1,也可用于其它人類T cell病毒的研究。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C63
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC 熒光素標記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/腹脂素/內(nèi)肥素 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
細胞毒性受體NK-p30抗體 Anti-CD337/NKp30/NCR3 0.1ml
Syntrophin gamma 2 英文名稱: 肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體 0.2ml
ERO1L 英文名稱: 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1-Lα抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GABBR2 (Ser783) 磷酸化G氨基丁酸B型受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
CK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
SSB/La(Sjogren syndrome type B Anti-gen) 抗干燥癥SSB/La蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD8 CD8單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh OTUB 泛素特異性蛋白酶Otubain2抗體 規(guī)格 0.2ml
CPB1 Kit Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對抗體 ELISA
Phospho-TSC2(Ser1798) 英文名稱: 磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 0.1ml
CUTA 英文名稱: 乙酰膽堿酯酶相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
Anti-CD8 CD8單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
UBC(Human urinary bladder cancer antigen) ELISA Kit 人膀胱癌抗原 96T
NMT1 英文名稱: 豆蔻?;D(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
Human scavenger receptor B,SRB ELISA Kit 人清道夫受體BMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
BDNF 英文名稱: 腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 0.1ml
Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465) 磷酸化細胞信號轉(zhuǎn)導分子Smad-1/5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
CALD(Human Caldesmon) ELISA Kit 人鈣調(diào)結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MCM7 染色體維持缺陷蛋白7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh JMJD1B 組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移酶JMJD1B抗體 規(guī)格 0.1ml
ANG-1 ELISA Kit 大鼠血管生成素1 96T
PKD1L3 英文名稱: 多囊腎蛋白1樣3抗體 0.2ml
C3orf55 英文名稱: 3號染色體開放閱讀框55抗體 0.2ml
Anti-MCM7 染色體維持缺陷蛋白7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml