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詳細(xì)介紹
小鼠腦瘤細(xì)胞；BC3H1價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 小鼠腦瘤細(xì)胞；BC3H1價(jià)格
形態(tài)特性 多角
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞來源于小鼠平滑肌樣腫瘤組織；可產(chǎn)生腺苷酸磷酸激酶和肌酸磷酸激酶；表達(dá)乙酰膽堿受體和H-2K，類似骨骼肌細(xì)胞分化停滯的狀態(tài)，而非平滑肌細(xì)胞；鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:2~1:10傳代；每周換液2次。
傳代情況 P18
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Reprimo/Rprm/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
GRGDS peptide 粘附多肽GRGDSMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg
Lpin1 抗體 Anti-Lpin1 protein 0.1ml
SH2D1A 英文名稱： 信號傳導(dǎo)T淋巴細(xì)胞活化相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
FAM82A1 英文名稱： 微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PKMYT1(Thr495) 磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
GRGDS peptide 粘附多肽GRGDSMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg
SAA (Rabbit Serum amyloid A) ELISA Kit 兔血清淀粉樣蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-CXC-R2/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DBX1 腦發(fā)育同源蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Mouse IgM/PE 熒光素PE標(biāo)記小鼠IgM 0.1ml
LRFN1 英文名稱： 神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh β-Amyloid(1-42) β淀粉樣肽(1-42)抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-CXC-R2/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TMB-2HC3,3′,5,5′tetramethylbenzidine,TMB TMB 2HCl 3,3’5,5’-四甲基聯(lián)苯胺二鹽酸 250mg
TGM3 英文名稱： 谷酰胺轉(zhuǎn)胺酶3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh NS5ATP9/KIAA0101 丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白5A反式激活蛋白9抗體 規(guī)格 0.2ml
P-Cadherin 人P-鈣粘附蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
C9orf103 英文名稱： 9號染色體開放閱讀框103抗體 0.2ml
Anti-Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) 磷酸化細(xì)胞角蛋白17抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit 人熱休克蛋白27Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-P73 protein P73抑制基因抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSD17B1 羥類固醇脫氫酶17β-HSD抗體 規(guī)格 0.1ml
ATG(Human anti-thymocyte globulin) ELISA Kit 人抗胸腺細(xì)胞球蛋白 96T
PDCD2L 英文名稱： 程序性細(xì)胞死亡2樣抗體 0.2ml
CKAP1 英文名稱： 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體 0.2ml
Anti-P73 protein P73抑制基因抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
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