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          小鼠雜交瘤細(xì)胞;4G10培養(yǎng)

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          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2018-05-07 13:22:06瀏覽次數(shù):383

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          小鼠雜交瘤細(xì)胞;4G10培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶!

          詳細(xì)介紹

          細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞;4G10培養(yǎng)
          形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

          品牌 半貼壁生長(zhǎng)

          特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。

          培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

          傳代方法 1:

          3傳代,2-3天傳一代  

          傳代情況 C25

          凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

          支原體檢測(cè) 陰性 

          STR

          同工酶

          染色體

          使用權(quán)限 A類

          小鼠雜交瘤細(xì)胞;4G10培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
          操作流程:
          1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
          1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
          1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
          1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
          1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
          1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
          1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
          1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
          Anti-Melamine/FITC 熒光素標(biāo)記抗三聚氰胺抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Anti-A/H1N1-M2 Human /Biotin 生物素標(biāo)記兔抗人A型人流感病毒H1N1-M2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H2B(K5) 乙?;M蛋白H2B抗體 規(guī)格 0.1ml

          Rabbit Anti-Biotin/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 0.1ml

          GPR21 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體21抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 規(guī)格 0.1ml

          Anti-A/H1N1-M2 Human /Biotin 生物素標(biāo)記兔抗人A型人流感病毒H1N1-M2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          MDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Anti-beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-BMX/ETK (Tyr556) 磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體 規(guī)格 0.1ml

          TBS緩沖液 100ml 0.05mol/L pH 7.6

          Vitronectin 英文名稱: 玻璃粘連蛋白抗體 0.1ml

          phospho-DAB2 (Ser24) 英文名稱: 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體 0.1ml

          Anti-beta-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
          RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維受體-α 多肽 0.5mg

          HTRA2 英文名稱: 線粒體絲酸蛋白酶抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh C17orf77 17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體 規(guī)格 0.2ml

          Anti-ets1/E26 /FITC 熒光素標(biāo)記Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Ron 原癌基因c-Met相關(guān)酪氨酸激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

          Anti-CHRNA4/FITC 熒光素標(biāo)記煙堿型乙酰膽堿受體α4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          Inhibin beta A peptide 抑制素beta A抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Anti-ADAM10/MADM/CD156c 去整合素樣金屬蛋白酶10抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-cdc25A (Thr506) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 規(guī)格 0.1ml

          DAPI染色液 -熒光蘭 100ml Sigma原料,自產(chǎn)

          phospho-VEGFR2(Tyr951) 英文名稱: 磷酸化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體 0.1ml

          phospho-Dynamin 1 (Ser778) 英文名稱: 磷酸化酶動(dòng)力蛋白1抗體 0.1ml

          Anti-ADAM10/MADM/CD156c 去整合素樣金屬蛋白酶10抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
          懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。

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