詳細(xì)介紹
大鼠乳腺癌細(xì)胞;SHZ-88價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 大鼠乳腺癌細(xì)胞;SHZ-88價(jià)格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 這株細(xì)胞源自DMBA誘導(dǎo)的大鼠乳房癌。 大多數(shù)細(xì)胞是上皮細(xì)胞樣的,也可以見到巨大細(xì)胞團(tuán)和病態(tài)有絲分裂;電鏡下可見細(xì)胞表面和橋粒上有微絲。 第3天的有絲分裂指數(shù)是59%。 移植到同源動(dòng)物中可以成活。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-MMP-11/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TSARG6/FITC 熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2抗體 規(guī)格 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml
GRID1 英文名稱: 谷酸受體δ1/GluR-δ1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PVRL1/CD111/Nectin1 脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-TSARG6/FITC 熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Lymphotactin 小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-FLASH/CASP8AP2 半胱氨酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM 小鼠抗兔IgM 規(guī)格 1mg
Alpha2-PI (Human Alpha2-plasmin inhititor) ELISA Kit 人α2纖溶酶抑制物 96T
Syntrophin-1+2+3 英文名稱: 互養(yǎng)蛋白1,2,3抗體 0.1ml
CCDC6 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體(狀甲狀腺癌編碼蛋白) 0.2ml
Anti-FLASH/CASP8AP2 半胱氨酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
Glypican 4 英文名稱: 磷脂?;嫉鞍拙厶?4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APOL6 載脂蛋白樣蛋白6抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-phospho-IKK beta (Tyr466) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-MG IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.3ml
Anti-Profilin 1/FITC 熒光素標(biāo)記前纖維蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse IgG1, kappa chain 兔抗小鼠IgG1k鏈 (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體 Anti-GRP94 0.1ml
Dog IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml
FAM160B1 英文名稱: FAM160B1蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235+Ser236) 磷酸化S6核糖體蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit anti-mouse IgG1, kappa chain 兔抗小鼠IgG1k鏈 (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg