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詳細(xì)介紹
牛陀螺狀細(xì)胞；BT價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 牛陀螺狀細(xì)胞；BT價格
形態(tài)特性
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞源自新生小牛，在含有牛源血清的培養(yǎng)基中不能生長?？捎糜谂Ｃ舾胁《镜呐囵B(yǎng)、檢測。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%HS
傳代方法 1：
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 P28
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-FAS/FITC 熒光素標(biāo)記FAS蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Nephrin Protein/FITC 熒光素標(biāo)記去氧腎上腺素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh C12ORF40 12號染色體開放閱讀框40抗體 規(guī)格 0.2ml
Bid (BH3 interacting domain death agonist) BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗原 0.5mg
HCG alpha 英文名稱： 人絨毛膜促性腺激素α亞基/hCG α 抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RNF215 環(huán)指蛋白215抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Nephrin Protein/FITC 熒光素標(biāo)記去氧腎上腺素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
KGF 2 Rabbit 兔角質(zhì)細(xì)胞生長因子 2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FN/Fibronectin 1 纖維連接蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.3ml
AO(Human Acrine Orange) ELISA Kit 人吖啶橙 96T
phospho-SynGAP (Ser836) 英文名稱： 磷酸化認(rèn)知缺陷突觸相關(guān)蛋白SynGAP抗體 0.1ml
CEACAM16 英文名稱： 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子16抗體 0.2ml
Anti-FN/Fibronectin 1 纖維連接蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit Anti-Mink IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗水貂IgG 0.3ml
GABA Transporter 2 英文名稱： γ基丁酸運載蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARL3 ADP核糖基化樣因子ARL3抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-IGF-1R/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素樣生長因子-I受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-MK IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-PLG/FITC 熒光素標(biāo)記纖維蛋白溶酶原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21 /FITC 熒光素標(biāo)記三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-GLP-2/FITC 熒光素標(biāo)記胰高血糖素樣肽-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh CK8 細(xì)胞角蛋白8抗體 規(guī)格 0.1ml
E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人瘤病毒16型E7蛋白抗原 0.5mg
IFNK 英文名稱： 干擾素kappa蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh TRAILR2/DR5/CD262 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-GLP-2/FITC 熒光素標(biāo)記胰高血糖素樣肽-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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