詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:雞源性核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管
貨號:YS-01P6393
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.1PCR管
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
2-乙 AR,99%1,1'-聯(lián)-2-萘酚 99%小鼠半乳糖6硫酯(Gal-6S)免疫試劑盒
2-乙 ≥99%, FCC, FG(5S)-N-[3-(4-溴-3-基)-2-氧代-5-惡唑烷基]乙酰 98%小鼠半胱氨蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)免疫試劑盒
正 GCS,≥99.8% (GC) 2-羥基-5-溴吡 98%小鼠百日咳病IgG抗體免疫試劑盒
正 AR,99.0% 雙(2,2,6,6,-四甲基-3,5-庚二酮)鋇 98%小鼠百白破抗體免疫試劑盒
正 CP,98.5% 2--5-甲基吡 98%小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒
正 for HPLC, ≥99.9%2--4-硝基咪唑 98%小鼠白血病抑制因子(LIF)免疫試劑盒
正 ACS, ≥99.5%2,7-二溴芴 98%小鼠白活化黏附因子(ALCAM)免疫試劑盒
正 分析標(biāo)準(zhǔn)品1,4-二酞 98%小鼠白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒
正 農(nóng)殘級4,4'-二聯(lián) 98%小鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒
AR,≥99.5% (GC) 9-芴甲 99% 小鼠白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒
≥99.5%, FCC, FG雙酚芴 98%小鼠白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
松油,異構(gòu)體混合物,CP(R)-3-(3-基)-5-羥甲基惡唑烷-2-酮 98%小鼠白介9(IL-9)免疫試劑盒
正戊 CP,98%(S)-N-[[3-(3-基)-2-氧代-5-惡唑烷基]甲基]乙酰 98%小鼠白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
正戊 >99% (GC)高良姜 98%小鼠白介7(IL-7)免疫試劑盒
4,4,4-三乙酰乙乙酯 98%2-羥基-6-甲基吡 98%小鼠白介6(IL-6)免疫試劑盒
雞源性核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒,3-四甲艾滋病病復(fù)制結(jié)合蛋白抗體
人溴脫氧核(BrdU)ELISA試劑盒,3-四甲AFP4b蛋白抗體
人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒,2,4-二甲HIV-1病復(fù)制結(jié)合蛋白2抗體
人血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒,2,4-二甲伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體
人?;さ鞍祝?/span>ASP)ELISA試劑盒,2,4-二甲心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體
小鼠層連蛋白/板層(LN)ELISA試劑盒,2,2-二-1,3-并二惡茂抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
小鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)ELISA試劑盒,2,2-二-1,3-并二惡茂抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
小鼠骨橋(OPN)ELISA試劑盒,3-鄰二甲抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體