詳細介紹
需自配儀器:
1、酶標儀(比色測定波長為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
基本信息:
產(chǎn)品名稱:糖原磷酸化酶a(GPa)紫外分光光度法
測試方法:紫外分光光度法
規(guī)格 :50管/48樣
貨號:YS-01S7062
測定意義
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。糖原的分解主要在GPa的催化下進行。
測定原理:
未添加激活劑時,GPa催化糖原和無機磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實驗
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
兔神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)聯(lián)吸附測定試劑盒油菜假單胞ADEI
兔性/通透性增加蛋白(BPI)聯(lián)吸附測定試劑盒 弗蘭克氏SMII (SWAI)
兔外信號調(diào)節(jié)激(ERK)聯(lián)吸附測定試劑盒 腐皮殼BCUI
兔蛋白二硫化物異構(gòu)A6(PDIA6)聯(lián)吸附測定試劑盒短短芽胞桿BCUI
兔血小板膜糖蛋白IV (GP4/CD36)聯(lián)吸附測定試劑盒洋蔥青霉BSEMI (BSRDI)
兔線粒體超氧化物歧化2(SOD2)聯(lián)吸附測定試劑盒新疆鹽紅BSEMI (BSRDI)
兔G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)聯(lián)吸附測定試劑盒耐林丹黃桿MBII (BSRBI)
兔固酮(ALD)聯(lián)吸附測定試劑盒 熒光假單胞PAGI (BSPHI)
兔載脂蛋白E(ApoE)聯(lián)吸附測定試劑盒 腐皮鐮孢PAGI (BSPHI)
兔血小板反應(yīng)蛋白4(TSP-4)聯(lián)吸附測定試劑盒 枯草芽孢桿TATI
兔間變性瘤激(ALK)聯(lián)吸附測定試劑盒 東方伊薩酵母XAGI (ECONI)
兔乳脫氫B(LDHB)聯(lián)吸附測定試劑盒 萊比托游動球BPLI
兔唾液淀粉α1(AMY1)聯(lián)吸附測定試劑盒 熱帶假絲酵母BPLI
兔角膜蛋白(KERA)聯(lián)吸附測定試劑盒中山乳芽胞桿中山亞種BSPPI (ALWI)
兔β淀粉樣前體蛋白(βAPP)聯(lián)吸附測定試劑盒猴頭BSPPI (ALWI)
糖原磷酸化酶a(GPa)紫外分光光度法谷受體紅藻離子5抗體Human IDH1(IsocitRate dehydrogenase [NADP] cytoplasmic) ELISA Kit魚腥草染料法PCR鑒定試劑盒
棕櫚酰轉(zhuǎn)移GODZ抗體Human UBA2 ELISA Kit人維生D受體(VD R)Elisa測定試劑盒
G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human UBA5 ELISA Kit小鼠顆粒A(Gzms-A)Elisa測定試劑盒
G基丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體Human UBA6 ELISA Kit小鼠胰島(INS)Elisa測定試劑盒
G蛋白α抗體Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) ELISA Kit小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)Elisa測定試劑盒
G蛋白β樣蛋白抗體Human TXNDC17 ELISA Kit大鼠血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)Elisa測定試劑盒
通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體Human TULP1 ELISA Kit豬C反應(yīng)蛋白(CRP)Elisa測定試劑盒
磷化gp130抗體Human TUFT1 ELISA Kit雞乙酰乙檢測(ACAC)Elisa測定試劑盒
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。