詳細(xì)介紹
ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:幽門螺旋桿菌尿毒酶ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Helicobacter pylori
檢測范圍:3.125U/L~100U/L
貨號:YS-E98978
性狀:盒狀液體。
實(shí)驗(yàn)方法:競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個(gè)月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
優(yōu)點(diǎn):
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動(dòng)物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,科研隊(duì)伍,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
Lactose Broth
甘羅溴銨 英文名稱:Gan Luo bromide 規(guī)格:100mg 保存:-20℃,避光
肉桂醇 英文名稱:Cinnamyl alcohol 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 保存:-20℃,避光
培哚普利雜質(zhì)S9780(培哚普利拉) 英文名稱:Perindopril impurity S9780 (perindoprilat) 規(guī)格:50mg 保存:-20℃,避光
TSI
EPHA4 ProteinRat重組大鼠 EphA4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CRP ProteinHuman重組人 CRP / C-Reactive 蛋白
VCL ProteinMouse重組小鼠 VCL / Vinculin 蛋白 (His 標(biāo)簽)
香薷 英文名稱:Elsholtzia 規(guī)格:3g 保存:-20℃,避光
乙酰哈巴苷 英文名稱:Acetyl Harpagide 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 保存:-20℃,避光
CCL7 ProteinHuman重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CALR ProteinHuman重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GFRA1 ProteinCanine重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FAM20B ProteinHuman重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
幽門螺旋桿菌尿毒酶ELISA檢測試劑盒 C9orf649號染色體開放閱讀框62抗體 cmDNA ELISA Kit 人抗膜DNA抗體 (cmDNA)ELISA試劑盒
C9orf669號染色體開放閱讀框64抗體 AGPA/PCA ELISA Kit 人抗胃壁抗體 (AGPA/PCA)ELISA試劑盒
C9orf689號染色體開放閱讀框66抗體 ARA ELISA Kit 人抗網(wǎng)硬蛋白抗體 (ARA)ELISA試劑盒
C9orf79號染色體開放閱讀框68抗體 SDA ELISA Kit 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體 (SDA)ELISA試劑盒
C9orf719號染色體開放閱讀框7抗體 DNP-Ab ELISA Kit 人抗脫氧核糖核蛋白抗體 (DNP-Ab)ELISA試劑盒
Casein Kappa9號染色體開放閱讀框71抗體 PsmAb ELISA Kit 人抗突觸前膜抗體 (PsmAb)ELISA試劑盒
C20orf26K-酪蛋白抗體 MCV ELISA Kit 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體 (MCV)ELISA試劑盒
C2CD4D20號染色體開放閱讀框26抗體 anti-MCV Ab ELISA Kit 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體 (anti-MCV Ab)ELISA試劑盒
CXXC5C2CD4D蛋白抗體 aZP ELISA Kit 人抗透明帶抗體 (aZP)ELISA試劑盒
CACNB2二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白5抗體 n-DNA-Ab ELISA Kit 人抗天然脫氧核糖核酸抗體 (n-DNA-Ab)ELISA試劑盒
CatalaseL-型電壓依賴型鈣通道β抗體 GP ELISA Kit 人抗糖蛋白抗體 (GP)ELISA試劑盒
CYP2C19過氧化氫酶抗體 MAG Ab ELISA Kit 人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體 (MAG Ab)ELISA試劑盒
Troponin T色素P450 2C19抗體 anti-myelin Ab ELISA Kit 人抗髓磷脂抗體 IgA(anti-myelin Ab)ELISA試劑盒
CD161 心肌特異性肌鈣蛋白T抗體 AMA IgA ELISA Kit 人抗髓磷脂抗體 IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒
C7orf65CD161抗體 dsDNA ELISA Kit 人抗雙鏈DNA抗體 /天然DNA抗體 (dsDNA)ELISA試劑盒